HR0439-100T 正常細胞、凋亡細胞與壞死細胞檢測試劑盒

正常細胞/凋亡細胞/壞死細胞檢測試劑盒是采用DNA 探針雙染細胞核的方法檢測細胞的狀態(tài)。染色液A 可以透過正常細胞膜,而細胞凋亡后,細胞膜對染色液A的通透性增加,染色液B不能透過細胞膜,對正常細胞和凋亡細胞不能染色,而對壞死細胞可以染色。...
試劑盒以外自備試劑和儀器:
● 流式細胞儀或熒光顯微鏡 ● PBS ● 純水 ● 移液器 ● 離心機
注意事項:
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液
體灑落。
● 細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
使用方法:
1、染色緩沖液的配制:
根據(jù)樣品數(shù)按下列比例配制染色緩沖液。取100μL試劑C加900μL無菌去離子水稀釋,混勻即成染色緩沖液。
2、收集樣本細胞,細胞數(shù)量在10×105個以內(nèi)。
3、用PBS洗滌細胞兩次。
4、用500μL-1mL染色緩沖液將細胞重懸。
5、加入5-10μL染色液A。
6、加入5-10μL染色液B。
7、輕輕混勻后4℃避光孵育10-20分鐘。
8、用PBS洗滌細胞。
9、用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測結(jié)果。染料A-DNA復合物的最大激發(fā)波長為350nm,最大發(fā)射波長為460nm,染料B-DNA復合物的最大激發(fā)和最大發(fā)射波長分別為488nm和615nm。
結(jié)果分析:
正常細胞為低藍色/低紅色(A+/B+),凋亡細胞為高藍色/低紅色(A++/B+),壞死細胞為低藍色/高紅色(A+/B++)。
形態(tài)學:正常細胞核形態(tài)呈圓形,淡藍色,內(nèi)有較深的藍色顆粒;凋亡細胞的核呈亮藍色,或核呈分葉狀,碎片狀。壞死細胞核紅色。
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