HR8824-200T 冰凍切片活性氧(ROS)檢測(cè)試劑盒(O12)

冰凍切片活性氧檢測(cè)試劑盒是一種利用熒光探針O12進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。O12本身沒(méi)有熒光,被活性氧特異性氧化生成綠色熒光物質(zhì),綠色熒光強(qiáng)度與活性氧水平成正比,檢測(cè)綠色熒光就可以知道組織內(nèi)活性氧的水平。在激發(fā)波長(zhǎng)500nm,發(fā)射波長(zhǎng)525 nm附近,使用熒光顯微鏡/激光共聚焦檢測(cè)綠色熒光,從而測(cè)定組織內(nèi)活性氧水平。...
產(chǎn)品特點(diǎn):
● 使用方便:可用熒光顯微鏡直接觀察;
● 背景低,靈敏度高;
● 線性范圍寬,使用方便。
檢測(cè)方法:
● 熒光顯微鏡 ● 激光共聚焦顯微鏡
樣本類(lèi)型:
● 新鮮冰凍切片
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:
● 熒光顯微鏡/激光共聚焦顯微鏡,激發(fā)波長(zhǎng)488-535nm,發(fā)射波長(zhǎng)525±15nm。
● 離心機(jī) ● 移液器 ● PBS或者HBSS(無(wú)酚紅)
使用注意事項(xiàng):
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 盡量縮短探針標(biāo)記后到測(cè)定所用的時(shí)間,以減少各種可能的誤差。
● 對(duì)于某些樣本,如果熒光太強(qiáng),可以按照1:200-1:1000稀釋探針。探針標(biāo)記的時(shí)間也可以根據(jù)情況在20-60分鐘內(nèi)適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。
● 以下操作步驟僅供參考,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際樣本情況調(diào)整。
使用方法:
一、 試劑配制
1、根據(jù)樣本數(shù),用純水將O12活性氧熒光探針200倍稀釋,配成染色工作液。
2、用純水將10×清洗液10倍稀釋,配成1×清洗液工作液。
二、探針標(biāo)記
1、準(zhǔn)備待測(cè)的厚為10μm的未經(jīng)固定處理的冰凍切片。
【注】:
● 建議使用新鮮組織(手術(shù)切除后1小時(shí)內(nèi))制成的冰凍切片。
2、室溫下,小心加上200μL清洗液工作液,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片表面,靜置5-10分鐘。
3、小心吸除清洗液。
4、滴加100μL染色工作液,在37℃培養(yǎng)箱避光孵育20-60分鐘。
【注】:
● 最好在濕盒中孵育,避免液體蒸發(fā)。
5、移除染色液。
6、用PBS洗滌切片2-3次。
7、加蓋玻片或甘油封片。
8、熒光顯微鏡檢測(cè)。
【注】:
● 染色完成后,立即進(jìn)行熒光定性分析。
● 激發(fā)波長(zhǎng)488nm,發(fā)射波長(zhǎng)525nm。
● 熒光增強(qiáng),表明活性氧(ROS)含量高。
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