ZN1984 Cy3標記親和素

產品簡介
Cy3標記親和素由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品僅用于生物化學研究方面,我公司的Cy3標記親和素品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括Cy3標記親和素(熒光素標記親和素)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:Cy3標記親和素(熒光素標記親和素)
英文名稱:Cy3 Co
產品貨號:ZN1984
產品規格:100μl
保存條件:置4℃保存一年,注意避光。
試劑內容:1ml CY3 標記Avidin 含 1mg 親和純化 Avidin,F/P==3-9/1,0.01M PBS,1%BSA,0.01%Thimerosal。其中Avidin經化學修飾,等電點由pH10降為pH6.5。
標記方法:Cy3 標記采用 Bayer,E.,et al.所研究的方法。(參考文獻:Bayer,E.,et al.,Meth.Enzymol.,62,308(1979)
使用方法:
Cy3標記試劑稀釋液:PBS或TBS 緩沖液,加入試劑級 BSA至1%。
使用上述稀釋液,免疫熒光法按 1:50-100 稀釋。具體的稀釋度須自己預先確定。
稀釋后溶液應于當天使用,未用完的應棄置。
CY3在554nm激化,在568-574nm發射熒光,呈鮮艷紅色。
注意事項:請離心后,再使用。
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名稱:Lo
貨號:SV0911
規格:500次(50μl體系)|100次(50μl體系)
概述:
Lo
Lo
Lo
其它劑型:
為了加樣方便,Lo
濃度:
2,500units/ml。
名稱:T4 多聚核苷酸激酶(3′磷酸酶活性缺失)
貨號:SV1045
規格:1KU|200U
特性:
DNA 或 RNA 5′ 末端的磷酸化,以便進行連接反應。
DNA 或 RNA 的末端標記,用作探針和進行 DNA 測序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3′ 磷酸基團
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3′ 磷酸酶活性)(M0236)將 3′ 端已經磷酸化的單核苷酸 5′ 磷酸化,制備pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3′ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3′ 磷酸酶活性)(M0236)對 3′ 端有磷酸基團的寡核苷酸的 5′ 端進行標記
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能夠催化 ATP 的 γ-位磷酸基團轉移到寡核苷酸鏈(雙鏈或單鏈 DNA 或 RNA)的 5′ -羥基末端以及 3′ -單磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)還具有 3′ 磷酸酶活性,將 3′ -磷酸基團從寡核苷酸的 3′ 磷酸末端、脫氧 3′ -單磷酸核苷和脫氧 3′ -二磷酸核苷上水解掉。經修飾后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3′ 磷酸酶活性。
來源:
重組 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修飾的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反應條件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反應緩沖液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 溫育。
熱失活:65℃ 加熱 20 分鐘。
注意事項:
達到zuì佳酶活力,需要新鮮緩沖液(在舊緩沖液中,由于氧化造成的 DTT 含量減少會降低酶活力)。
放射性標記反應:
50 μl 反應體系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反應緩沖液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 單位的酶 37℃ 溫育 30 分鐘可催化 1-50 pmol 的 5′ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作標記反應。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作為磷酸供體。
DNA 或 RNA 磷酸化反應(放射性和非放射性)操作流程請聯系我們咨詢。
要提高平齊末端或 5′ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先將 DNA 溶液于 70℃ 加熱 5 分鐘,然后冰上冷卻,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能發揮活性,但是為了適用于高活力的放射性標記反應:,在隨酶提供的反應緩沖液中不含 ATP。
一般來說,進行激酶反應之后是連接反應。在這種情況下,T4 多聚核苷酸激酶反應在連接酶反應緩沖液中 37℃ 溫育 30 分鐘即可。反應后的產物可直接進行連接,無需改變緩沖液和進行熱失活。如果連接時需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化狀態,則需要在連接反應前熱失活 T4 多聚核苷酸激酶。
質保聲明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3′ 磷酸酶活性缺失)經過嚴格的質控檢測,確保該產品具有zuì高的活性和純度。
單位定義:
1 單位即 1 個 Richardson 單位,指 37℃條件下,30 分鐘內催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 摻入所需要的酶量(1)。
濃度:
10,000 units/ml。
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