ZN1871 BCA蛋白濃度測定試劑盒

產品簡介
BCA蛋白濃度測定試劑盒是高品質的免疫檢測產品,由北京百奧萊博供應,本產品僅用于生物化學研究方面,BCA蛋白濃度測定試劑盒是我司眾多優質免疫檢測之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括BCA蛋白濃度測定試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:BCA蛋白濃度測定試劑盒
產品貨號:ZN1871
產品規格:250次/500次/2500次
主要成份:
A 液 50ml
B 液 2.5ml
蛋白標準品 10ml(2mg/ml)
產品描述:應用試管法可以測量 25 管,微孔板法可以測量 250 孔。
產品保存:室溫保存,一年內有效。
產品說明:堿性條件下,蛋白將 Cu2+還原為Cu+,Cu+與 BCA 試劑形成紫顏色的絡合物,吸光度強度與蛋白濃度成正比。測定其在 562nm 處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。
1.準確靈敏,線性范圍廣,BCA 試劑的蛋白質測定范圍是 20-2000μg/ml。
2.快速:45分鐘內完成測定。
3.經濟實用:在微孔板中進行測定,可大大節約樣品和試劑用量。
4.不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響。
5.檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
注意事項:
1.低溫或長期保存,若發現 BCA 試劑 A或者試劑 B 有沉淀發生。請 37oC 溫育并伴隨攪拌促使其充分溶解。如發現細菌污染,則應丟棄,避免對實驗結果造成影響。
2.不受大部分樣品中的化學物質的影響,可以兼容樣品中 5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80 等。(詳情見附錄)
3 每次測量蛋白濃度均應做標準曲線。
4.當試劑 A和 B 混合時會有渾濁,混勻后就會消失。
5.需準備 37℃水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計,測定波長為540-595nm 之間,562nm zuì佳。酶標儀需與 96 孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時,試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時,應注意防止因水分蒸發影響檢測結果。
6.使用 BCA 蛋白測定法測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深,并且顯色反應的速度和溫度有關,因此需注意保持定時和定溫,以確保定量。
7.實驗操作規范,提高上樣量的度。
使用方法:
一.配制 BSA 標準品
注:標準品稀釋液為蛋白樣品的溶解液,原則上蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS 進行稀釋。
二.配制 BCA 工作液
A.計算所需要的總 BCA 工作液體積。
總 BCA 工作液體積=(標準品+待測樣品)×重復數×每個樣品所需要的BCA 工作液
注意:試管法檢測時每個樣品加 2.0ml BCA 工作液,微孔板檢測每個樣品加 200μl BCA 工作液。
B.配制 BCA 工作液:50 體積的BCA 試劑 A 中加入 1 體積的BCA 試劑 B(A:B=50:1),充分混勻。
注意:BCA 試劑 B 加入 BCA 試劑 A 中后,迅速渾濁,通過混勻后立即變澄清。BCA 工作液裝入密封容器內,室溫條件 24h 穩定。
三.試管法(樣品:BCA 工作液=1:20)
1.各取 100μl 標準品和待測樣品加入到反應管中。
2.每管加入 2.0ml BCA 工作液,混勻。37℃孵育30min。
注意:也可室溫孵育2h,或者 60℃孵育30min。BCA 檢測蛋白濃度,延長孵育時間會加深顏色反應。升高溫度會加快顯色反應。但是溫度升高和時間延長會降低檢測下限,以及降低工作線性范圍
3.冷卻到室溫。在分光光度計上進行檢測,設定波長為562nm。用裝滿水的比色皿對儀器校零。然后在 10分鐘內對所有樣品讀數。
注意:由于 BCA 反應達不到真正的反應終點,即使溫度降低至室溫生色反應液會繼續。但是,由于室溫下生色比率相當低,因此若是 10min 內能對所有的樣本進行 562nm 吸光度的測試,不會導致明顯錯誤。
4.根據 BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即zuì終的讀數),繪制標準曲線(X-蛋白濃度 μg/ml;
Y-zuì終的OD562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。
四.微孔板法(樣品:BCA 工作液=1:8)
1.各取 25μl 標準品和待測樣品加入到微孔板中。
注意:樣品與工作液比例為1:8,若樣品有限,可使用 10μl 標準品和待檢測樣品進行檢測(即 1:20),這時試劑盒的檢測范圍為125-2000μg/ml。
2.每孔加入 200μl BCA 工作液,振蕩 30s 充分混勻。蓋上微孔板,37℃孵育30min。
3.冷卻到室溫,在酶標儀上的540~595nm 波長范圍處檢測吸光度,其中 562nm 波長為zuì佳。
注意:延長孵育時間或者提高樣品:BCA 工作比會增高每個孔的OD562nm 凈值,并且降低檢測下限和工作線性范圍。
4.根據 BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即zuì終的讀數),繪制標準曲線(X-蛋白濃度 μg/ml;
Y-zuì終的OD562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度
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名稱:Kisser封片液(不含苯酚)
貨號:YT093
規格:10ml
本品是一種根據經典的Kisser方法配制的水性封片液,但經過改良,不再含Kisser方法中含有的劇毒苯酚,可以用于常規的各種切片、涂片等的封片。本Kisser封片液(phenol free)中的主要有效成分為明膠和甘油。按照每個樣品封片需要50微升計算,足夠用于200個樣品的封片。
注意事項:封片液在溫度較低時呈固態,使用前須在37-50℃溫育,并在完全溶解后使用。
儲存條件:4℃避光,有效期一年。
名稱:Cy3抗兔免疫熒光染色試劑盒
貨號:YT107
規格:>300次
本試劑盒含有Cy3標記的山羊抗兔IgG(H+L)抗體,可以用于檢測兔來源的相應一抗,觀察到的顏色為非常鮮艷的紅色。Cy3是近年新開發的一種紅色熒光探針。它比大部分其它的紅色熒光探針更加明亮,更加不容易淬滅,而且背景更低。Cy3的吸收峰550nm、發射峰570nm。本試劑盒提供了含有熒光標記抗體穩定劑的免疫熒光染色二抗稀釋液,可以確保熒光標記抗體稀釋后在4℃可以保存長達6個月,并且在6個月內至少可以重復使用10次。本試劑盒含有抗熒光淬滅封片液,可以使熒光更加持久。本試劑盒對于六孔板內的細胞樣品或常規切片,至少可以檢測300個樣品。
試劑盒組份:
抗兔Cy3————————————30μl
免疫熒光染色二抗稀釋液—————50ml
抗熒光淬滅封片液————————15ml
注意事項:
1. 需熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
2. 在使用抗熒光淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅,但仍宜盡量避光,特別是需要盡量縮短在熒光顯微鏡下的觀察時間。
3. 熒光物質均易發生淬滅,染色后宜盡快進行熒光顯微鏡下的觀察。如果不能及時觀察可以4℃避光保存,但存放時間通常不宜超過一周,隨著存放時間的延長可能會導致觀察效果越來越差。
4. 免疫熒光染色效果的好壞和一抗的關系非常密切。建議選購有較多文獻報道的并注明可以用于免疫熒光染色的一抗用于本實驗。
5. 如果觀察時發現熒光過弱,可以適當提高一抗的濃度;如果熒光還是比較弱,可以適當提高熒光標記抗體的濃度。
儲存條件:-20℃,有效期一年。

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