BTN170401 特異性顯色基質(zhì)鱟試劑盒

特異性顯色基質(zhì)鱟試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品僅用于生物化學(xué)研究方面,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要特異性顯色基質(zhì)鱟試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
特別提示:包括特異性顯色基質(zhì)鱟試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:特異性顯色基質(zhì)鱟試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):BTN170401
產(chǎn)品規(guī)格:32次
鱟試劑為鱟科動(dòng)物東方鱟的血液變形細(xì)胞溶解物的冷凍干燥品,鱟試劑中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在適宜的條件下(溫度,pH值及無干擾物質(zhì)),細(xì)菌內(nèi)毒素激活C 因子,引起一系列酶促反應(yīng),激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的顯色基質(zhì),使其分解為多肽和黃色的對硝基苯胺(pNA,λmax=405nm)。在一定時(shí)間內(nèi),pNA的生成量與細(xì)菌內(nèi)毒素濃度成正相關(guān),據(jù)此,可以定量樣品的內(nèi)毒素濃度。同時(shí),對硝基苯胺(pNA)也可用偶氮化試劑染成玫瑰紅色(λmax = 545nm),避免了樣品本身的顏色對405nm處吸收峰的干擾。特異性鱟試劑是在鱟試劑的配方中添加G因子旁路抑制劑,使鱟試劑對(1,3)β-D-葡聚糖產(chǎn)生假陽性反應(yīng),使檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。本鱟試劑對細(xì)菌內(nèi)毒素的反應(yīng)是特異的,抗干擾能力比普通鱟試劑更強(qiáng),使用時(shí)只需用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水直接溶解即可,不需另外添加G因子抑制劑(抗增液)。
試劑盒特點(diǎn):
1. 僅用于體外細(xì)菌內(nèi)毒素的定量檢測,嚴(yán)禁試劑以任何途徑進(jìn)入機(jī)體。
2. 接觸試劑及樣品的所有器皿必須是除熱原的。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)防止微生物的污染。該說明書中的除熱原指內(nèi)毒素濃度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可經(jīng)250℃干烤至少60分鐘去除熱原。
3. 待測樣品的pH值應(yīng)在6.0–8.0之間,若超出此范圍,需用除熱原的緩沖液、0.1M氫氧化鈉或0.1M 鹽酸調(diào)節(jié)。
4. 當(dāng)樣品中可能存在鱟實(shí)驗(yàn)的干擾物質(zhì)時(shí),須進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品 | 2支 |
| 特異性鱟試劑 | 2 支×1.7mL |
| 顯色基質(zhì) | 2 支×1.7mL |
| 偶氮化試劑1 | 2 支×10mL |
| 偶氮化試劑2 | 2 支×10mL |
| 偶氮化試劑3 | 2 支×10mL |
| HCl(反應(yīng)終止劑) | 50ml |
| 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水 | 50mL×2 瓶 |
| 除熱原試管,10×75mm | 10×5 支 |
| 除熱原吸頭,1000VL | 10×4 支 |
| 除熱原吸頭,200VL | 1盒 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃避光保存,有效期兩年。
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名稱:非凍型血液DNA保存液
貨號(hào):BTN60910
規(guī)格:250mL
本品是在室溫條件下長期保存用于DNA提取的血液樣品的保存液,它通過裂解細(xì)胞并抑制DNase的活性而達(dá)到長期保證DNA分子的完整性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 保存時(shí)間長,可常溫保存血液DNA 長達(dá)六個(gè)月,尤其適合于野外血液樣品采集。
2. DNA 完整性好,純化后長度在20-50 Kb之間。
3. DNA 無化學(xué)修飾,提得的DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
4.適用于各種動(dòng)物血液(包括禽類血液)。
5. 安全可靠,本產(chǎn)品無害。
6. 使用簡單,直接把新鮮的血液樣品與本產(chǎn)品混合即可。
儲(chǔ)存條件:室溫運(yùn)輸及保存,有效期兩年。
使用方法:
一: 哺乳動(dòng)物血液(包括人血液)
1. 將抗凝血(1-10mL)加入到適當(dāng)容量的塑料離心管中。
2. 加入等體積的血液DNAhold,充分振蕩混合均勻。
3. 常溫閉光保存直到使用。
4. 提取DNA時(shí),可以取出部分液體,用自備的蛋白酶K(終濃度為0.1mg/mL)37℃處理過夜,然后再用經(jīng)典的酚/lǜ仿抽提+乙醇沉淀方法得到DNA。
二: 禽類血液
由于禽類血液有核細(xì)胞量遠(yuǎn)高于哺乳動(dòng)物,血液的使用量很少,一般只有哺乳動(dòng)物血液用量的1/100 到1/1000,所以需先用等體積的水將血液DNAhold稀釋,然后直接將禽類血液加入。其余操作同上。
名稱:柱式病毒DNA提取試劑盒
貨號(hào):BTN70701
規(guī)格:50次
本試劑盒是在一管式病毒DNA提取試劑盒的基礎(chǔ)上開發(fā)的、專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道拭子等)中提取微量病毒DNA的產(chǎn)品。
試劑盒特點(diǎn):
1. 操作簡單,整個(gè)過程只需要20分鐘左右,不需要額外在洗柱液中補(bǔ)加乙醇。
2. 靈敏度高,通過PCR 檢測到的zuì終靈敏度可以達(dá)到30-50拷貝/mL。
3. 安全,不需要使用苯酚和lǜ仿等有機(jī)溶液。
4. 如果加上病毒離心富集步驟,zuì多可以處理1.5mL液體病毒樣品。
5.與PCR和熒光PCR 兼容。
6. 價(jià)廉物美,遠(yuǎn)高于國外同類產(chǎn)品。
7.適用于各種材料,包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A | 30ml |
| 離心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脫液3.0 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 對于液體病毒樣品:在1.5mL離心管中加入0.1-0.2mL液體病毒樣品。如果病毒需要富集,可以將1.5mL液體在4℃ 24,000 g 冷凍離心60分鐘,移棄1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步處理。對于拭子樣品:將一個(gè)拭子放入離心管中,加入1mL自備的生理鹽水,振蕩器上充分振蕩半分鐘,然后轉(zhuǎn)移0.2mL 到1.5mL塑料離心管中,用于第2 步處理。
2. 加入0.6mL溶液A到步得到的0.2mL樣品中,振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。注意:溶液A在4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 短暫離心后將500μl溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置2分鐘。
4. 12000rpm室溫離心1分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
5. 將剩余溶液短暫離心后全部轉(zhuǎn)移到步驟3的離心吸附柱中,室溫放置2分鐘。
6. 12000rpm室溫離心1分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000 rmp室溫離心1分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室溫離心1分鐘(干甩),棄含穿透液的離心管。
9. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個(gè)自備的RNase-free的1.5mL離心管中,在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100μl DNA 洗脫液3.0,然后室溫放置2分鐘。
10. 12000rpm室溫離心1分鐘,離心管中的溶液即為病毒DNA溶液。
11. DNA樣品可以直接用于PCR,也可放-20℃長期保存。
疑難解答:
Q:提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難?
A:原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質(zhì)保存,每個(gè)病毒zuì多只攜帶幾個(gè)拷貝(而一個(gè)細(xì)胞中有上萬種RNA分子,每種RNA 有很多拷貝),同時(shí)其長度也十分有限(一般不到細(xì)胞基因組的萬分之一),樣品中病毒數(shù)往往又不是很多,使得樣品中病毒核酸的量往往比一個(gè)細(xì)胞中核酸的量還少,所以操作中十分容易丟失。另外,由于得到的核酸量很少,不能使用電泳和測OD檢測,只能通過PCR或RT-PCR 檢測,而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化,所以要確定提取是否成功十分不容易。
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