WH0012 血液基因組DNA提取試劑盒（0.
- 產品/服務：WH0012 血液基因組DNA提取試劑盒（0.
- 型 號：WH0012
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-24
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：864
產品簡介
血液基因組DNA提取試劑盒（0.的品牌是百奧萊博，是優質的DNA提取純化產品，本制品僅用于生物化學研究方面，本品質量穩定，價位合理，需要血液基因組DNA提取試劑盒（0.等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括血液基因組DNA提取試劑盒（0.1-1ml)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：血液基因組DNA提取試劑盒（0.1-1ml)
英文名稱：Extraction kit for genomic DNA from blood（0.1-1ml)
產品貨號：WH0012
產品規格：50次|200次
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，提取血液中的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有材料，、專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。
產品特點：
·樣本適用廣泛：可從抗凝血（EDTA，肝素等）、白膜層和血凝塊等樣品中直接提取基因組DNA；
·高質量：獨特的裂解緩沖體系，純化的DNA具有高濃度，高純度，完整性好等特點，滿足芯片雜交，高通量測序等實驗需求；
·快速：采用硅膠膜吸附原理，無需酚/氯fǎng，1h內即可完成實驗。
·應用范圍廣：適用于酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等各種常規實驗，和芯片雜交、高通量測序等下有實驗。
提取實例：
用本試劑盒提取不同體積血液基因組，1%瓊脂糖凝膠，6V/cm，電泳20min，Marker為λDNA/Hind III。
提取得率：
| 材料 | 提取量 | DNA得量 |
| 哺乳動物全血 | 100μl-1ml | 3-30μg |
| 禽類、兩棲類全血 | 5-20 μl | 5-40 μg |
試劑盒組成：
| 組分 | 50T | 200T |
| 細胞裂解液CL | 60 ml | 250 ml |
| 緩沖液GS | 15 ml | 50 ml |
| 緩沖液GB | 15 ml | 50 ml |
| 緩沖液GD | 13 ml | 52 ml |
| 漂洗液PW | 15 ml | 50 ml |
| 洗脫緩沖液TB | 15 ml | 60ml |
| Proteinase K | 1ml | 4×1ml |
| 吸附柱CB3 | 50個 | 200個 |
| 收集管（2 ml) | 50個 | 200個 |
| 1.5 ml離心管 | 50個 | 200個 |
保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產生沉淀，使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預熱10min，以溶解沉淀。
自備試劑：RNase A（100mg/ml) （目錄號：WH0217)，異丙醇，乙醇
注意事項：（請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)
1．樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小、提取量下降。
2．若緩沖液GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，搖勻后使用。
3．所有離心步驟均為使用臺式離心機，室溫下離心。
使用方法：
使用前先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。
1．處理血液材料（本產品適用于處理已添加抗凝劑的100μl-1ml血液樣品）：
a.當血液樣品體積小于200 μl時，可加緩沖液GS補足體積至200 μl，再進行下一步實驗（如血液樣品體積為200 μl，可直接進行下一步實驗，不需加入GS)。
b.當血液樣品體積超過200 μl時，需用細胞裂解液CL處理，具體步驟如下：
在樣品中加入1-2.5倍體積的細胞裂解液CL，顛倒混勻，10000rpm（~11500×g )離心1 min，吸去上清，留下細胞核沉淀（如果裂解不徹底，可重復以上步驟一次），向離心收集到的細胞核沉淀中加200 μl緩沖液GS，振蕩至徹底混勻。
c.如果處理血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的抗凝血液，其紅細胞為有核細胞，因此處理量5-20 μl，可加緩沖液GS補足200 μl后進行下面的裂解步驟。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100mg/ml）溶液（目錄號：WH0217），振蕩15 sec，室溫放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，混勻。
3．加200 μl緩沖液GB，充分顛倒混勻，56℃放置10min，其間顛倒混勻數次，溶液應變清亮（如溶液未徹底變清亮，請延長裂解時間至溶液清亮為止）。
注意：加入緩沖液GB時可能會產生白色沉淀，一般37℃放置時會消失，不會影響后續實驗。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取DNA量少和提取出的DNA不純。當血液體積≤200 μl且沒有采用紅細胞裂解處理，或是樣本儲存條件不佳，水浴后顏色可能為深褐色，注意溶液中沒有團塊等沉淀。
4．加200 μl無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能會出現絮狀沉淀。
5．將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中（吸附柱CB3放入收集管中），12000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放入收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl緩沖液GD（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放入收集管中。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放入收集管中。
8．重復操作步驟7。
9．12000rpm（~13400×g)離心2 min，倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應（酶切、PCR等）實驗。
10．將吸附柱CB3轉入1.5 ml離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加50-200 μl洗脫緩沖液TB，室溫放置2-5 min，12000rpm（~13400×g )離心2 min，將溶液收集到離心管中。
注意：洗脫緩沖液體積不應少于50 μl，體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g )離心2 min。洗脫液的pH對于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。
DNA濃度及純度檢測：
1．得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
2．DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當于大約50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
3．OD260/OD280比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。
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