WH0019 糞便基因組DNA提取試劑盒（離心
- 產品/服務：WH0019 糞便基因組DNA提取試劑盒（離心
- 型 號：WH0019
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-24
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1007
產品簡介
北京百奧萊博供應的糞便基因組DNA提取試劑盒（離心用于科學研究，我公司的糞便基因組DNA提取試劑盒（離心品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括糞便基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：糞便基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)
英文名稱：Extraction kit for genomic DNA from faeces
產品貨號：WH0019
產品規格：50次
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特沉淀系統提取糞便樣本的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有材料，能夠、專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。獨特沉淀劑可以有效去除樣品中的雜質。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可直接用于PCR等其它分子生物學下游實驗。
產品特點：
·適用范圍廣：適用于不同來源的固態或液態糞便樣本。
·簡單快速：1h內即可獲得超純的基因組DNA。
·高純度：的沉淀劑去除腐殖酸等雜質，提取的DNA純度很高，可直接用于下游實驗。
試劑盒組成：
| 組分 | 50T |
| 緩沖液SA | 30ml |
| 緩沖液SC | 5 ml |
| 緩沖液SH | 10 ml |
| 緩沖液GFA | 10 ml |
| 緩沖液GD | 13 ml |
| 漂洗液PW | 15 ml |
| 洗脫緩沖液TB | 15 ml |
| Proteinase K | 1 ml |
| RNase A（10mg/ml) | 600μl |
| 1mm研磨珠 | 15g |
| RNase-Free吸附柱CR2 | 50個 |
| 收集管（2ml) | 50個 |
保存條件：室溫（15-25℃)干燥條件下可保存12個月；更長時間的保存可置于2-8℃。
注意事項：（請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)
1．樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
2．若緩沖液SA或SC中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，并搖勻后使用。
3．建議充分混勻樣品，如果樣品混勻不充分可能影響裂解效率，zuì終影響得率和比值。
4．如果樣品吸水較多，可以等比例增加緩沖液SA和SC的量，如果緩沖液SA和SC不足，可單獨購買。
使用方法：
使用前請先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇，緩沖液GFA中加入異丙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。
1．稱取糞便樣本180-220mg至2 ml離心管中，并將管子置于冰上。
注意：如果是液態樣本則轉移200 μl至離心管中。
2．向樣本中加入500 μl緩沖液SA，100 μl緩沖液SC，15 μl Proteinase K，0.25g的研磨珠間歇振蕩1min至樣本充分混勻或使用TGrinder H24組織研磨均質儀（OSE-TH-01）混勻（6M/S的速度振蕩30s，間隔30s，共2個循環）。
3．70℃孵育15 min，孵育期間震蕩2-3次。
注意：對于較難破壁的革蘭氏陽性菌，可將溫度提高至95℃以促進裂解。
4．渦旋15 sec，12000rpm （~13400×g )離心3 min，轉移上清液至新的離心管中，加入10μl的RNase A，震蕩混勻后室溫放置5min。
5．加入200 μl緩沖液SH，震蕩混勻，置冰上5min。
6．12000rpm （~13400×g )離心3 min。
7．將上一步所得上清液轉移至新的1.5 ml離心管，加入等體積緩沖液GFA （使用前請先檢查是否已加入異丙醇)。
8．將上一步所得溶液加入到一個吸附柱CR2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉廢液，將吸附柱CR2放入收集管中。
9．向吸附柱CR2中加入500 μl緩沖液GD （使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉廢液，將吸附柱CR2放入收集管中。
10．向吸附柱CR2中加入700 μl漂洗液PW （使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12,000rpm（~13400×g )離心30 sec，倒掉廢液，吸附柱CR2放入收集管中。
11．重復操作步驟10。
12．將吸附柱CR2放回收集管中，12000rpm（~13400×g)離心2 min，倒掉廢液。將吸附柱CR2置于室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應（酶切、PCR等）實驗。
13．將吸附柱CR2轉入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50 μl洗脫緩沖液TB，室溫放置2-5 min，12000rpm （~13400×g )離心2 min，將溶液收集到離心管中。
注意：為增加基因組DNA的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g )離心2 min。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。
DNA濃度及純度檢測：
1．得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
2．DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
3．OD260/OD280比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。
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