WE0155 BaldStar TaqMan
- 產(chǎn)品/服務(wù)：WE0155 BaldStar TaqMan
- 型 號(hào)：WE0155
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-04-24
- 有效期至：長(zhǎng)期有效
- 瀏覽次數(shù)：861
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
北京百奧萊博供應(yīng)的BaldStar TaqMan 用于科學(xué)研究，我公司的BaldStar TaqMan 品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)
英文名稱：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(Low ROX)
產(chǎn)品貨號(hào)：WE0155
產(chǎn)品規(guī)格：5ml
本品是專用于探針法(TaqMan，Molecular Beacon等)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系，濃度為2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作簡(jiǎn)單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉(zhuǎn)錄后的cDNA靶序列的檢測(cè)，如基因表達(dá)分析，拷貝數(shù)分析，SNP基因型分析等。本產(chǎn)品中運(yùn)用了dUTP-UNG防污染系統(tǒng)，在PCR反應(yīng)體系配制過程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU堿基的擴(kuò)增產(chǎn)物。而此產(chǎn)物可以在下次進(jìn)行PCR反應(yīng)前，由PCR體系中的UNG酶處理消除。這樣就有效的去除了PCR產(chǎn)物的殘留污染，大大降低了由于擴(kuò)增產(chǎn)物污染而導(dǎo)致的假陽性。UNG酶在PCR循環(huán)中的預(yù)變性步驟即可被滅活，因此不會(huì)影響新的含dU堿基PCR產(chǎn)物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學(xué)修飾的、全新熱啟動(dòng)酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增，酶的激活須在95℃下孵育10分鐘。獨(dú)特的 PCR緩沖體系與熱啟動(dòng)酶的組合，顯著提高了PCR的擴(kuò)增效率，熒光信號(hào)更強(qiáng)，靈敏度更高，可以檢測(cè)單拷貝的模板。使用本產(chǎn)品可以得到更廣的線性范圍，對(duì)目的基因定量更準(zhǔn)確。
ROX染料用于校正定量PCR儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 擴(kuò)增儀。不同儀器的激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)有所不同，因此ROX染料的濃度必須與相應(yīng)的熒光定量PCR儀相匹配。
不需要ROX校正的儀器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的儀器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的儀器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
產(chǎn)品組成：
| 組份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事項(xiàng)：
1、使用前請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。
2、避免反復(fù)凍融本品，反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長(zhǎng)期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用，可在2～8℃保存。
使用方法：
以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。
1、PCR反應(yīng)體系
| 試劑 | 50μl反應(yīng)體系 | 終濃度 |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可選) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意：
1)通常引物濃度以0.2μM可以得到較好結(jié)果，可以在0.1-1.0μM作為設(shè)定范圍的參考。
2)使用的探針濃度，與使用的熒光定量PCR儀、探針種類、熒光標(biāo)記物質(zhì)種類有關(guān)，實(shí)際使用時(shí)請(qǐng)參照儀器說明書，或各熒光探針的具體使用要求進(jìn)行濃度的調(diào)節(jié)。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因組DNA或1-10ng cDNA為參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數(shù)不同，可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋，以確定zuì佳的模板使用量。
4)不同儀器的激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)有所不同，根據(jù)使用熒光定量的儀器選擇加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反應(yīng)程序
注意！本產(chǎn)品預(yù)變性反應(yīng)必須在95℃ 10分鐘下完成！
兩步法PCR：
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 10 min | |
| 變性 | 95℃ | 15 s | 35-40個(gè)循環(huán) |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意：
1)本產(chǎn)品所采用的熱啟動(dòng)酶須在預(yù)變性95℃、10 min條件下實(shí)現(xiàn)酶的活化。
2)建議采用兩步法PCR反應(yīng)程序，若因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，可嘗試進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。
三步法PCR：
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 10 min | |
| 變性 | 95℃ | 15 s | 35-40個(gè)循環(huán) |
| 退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s |
儲(chǔ)存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融
根據(jù)您的關(guān)注的BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| BTN70906 | NTP溶液(10mM) | 0.5mL |
| BTN131181 | EDTA溶液 | 1mL |
| YT373 | YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer) | 200U|1000U |
| WE0129 | 一步法RT-PCR試劑盒 | 100次 |
| ALH185 | SYBR Green qPCR預(yù)混液 | 50μl×50次|50μl×200次 |
| RFT161 | BSA溶液(PCR級(jí)) | 5×1ml |
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關(guān)注BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：
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