高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒
英文名稱：High Purity Plasmid micro Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：WH0037
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞，再通過(guò)離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有材料，、專一吸附DNA。由于增加了過(guò)濾柱，與普通的提取方法相比，本試劑盒可zuì大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物，適用于提取1-5ml過(guò)夜培養(yǎng)的大腸桿菌，質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件，細(xì)胞的裂解，質(zhì)粒拷貝數(shù)，質(zhì)粒的穩(wěn)定性，抗生素等因素有關(guān)。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞及各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、連接等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
·高純度：提取的質(zhì)粒DNA可直接用于轉(zhuǎn)染等高要求實(shí)驗(yàn)。
·快速：步驟少，操作簡(jiǎn)單，節(jié)省時(shí)間。
·：可提取菌體85%以上質(zhì)粒DNA。

質(zhì)粒得率：

質(zhì)粒類型	處理量	得率	質(zhì)粒
高拷貝質(zhì)粒	1-5ml	6-30μg	pTZ,pUC,pBS,pTG-T
低拷貝質(zhì)粒	1-5ml	3-12μg	pBR322,pACYC及其衍生載體pSC101 及其衍生載體，SuperCos,pWE15

試劑盒組成：

組分	50T
平衡液BL	30ml
溶液P1	15ml
溶液P2	15ml
溶液P3	20ml
去蛋白液PD	30ml
漂洗液PW	15ml
洗脫緩沖液TB	15ml
RNaseA（10mg/ml)	150μl
過(guò)濾柱CS	50個(gè)
吸附柱CP3	50個(gè)
收集管（2ml)	100個(gè)

保存條件：室溫（15-25℃)干燥條件下，可保存12個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min，以溶解沉淀。次使用前將RNase A加入溶液P1中，混勻后置于2-8℃保存，可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。單獨(dú)包裝的RNase A在室溫可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。

注意事項(xiàng)：（請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1．溶液P1在使用前先加入RNase A（將試劑盒中提供的RNase A全部加入），混勻，置于2-8℃保存。
2．使用前先檢查平衡液BL、溶液P2和P3是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
3．注意不要直接接觸溶液P2和P3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
4．所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心，速度為12000rpm （~13400×g)。
5．提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。
6．實(shí)驗(yàn)前使用平衡液處理吸附柱，可以zuì大限度激活硅基質(zhì)膜，提高得率。
7．用平衡液處理過(guò)的柱子zuì好當(dāng)天使用，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響效果。

使用方法：
使用前請(qǐng)先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

1．柱平衡步驟：向吸附柱CP3中（吸附柱放入收集管中）加入500μl的平衡液BL，12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）
2．取1-5ml過(guò)夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中，12000rpm （~13400×g )離心1 min，盡量吸除上清（菌液較多時(shí)可以通過(guò)幾次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中）。
3．向留有菌體沉淀的離心管中加入250 μl溶液P1 （請(qǐng)先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。
  注意：如果有未徹底混勻的菌塊，會(huì)影響裂解，導(dǎo)致提取量和純度偏低。
4．向離心管中加入250 μl溶液P2，溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。
  注意：溫和地混合，不要?jiǎng)×艺鹗帲悦獯驍嗷蚪MDNA，造成提取的質(zhì)粒中混有基因組DNA片斷。此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠，所用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)5 min，以免質(zhì)粒受到破壞。如果未變得清亮，可能由于菌體過(guò)多，裂解不徹底，應(yīng)減少菌體量。
5.向離心管中加入350 μl溶液P3，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12000rpm （~13400×g )離心10min，用移液器小心地將上清轉(zhuǎn)移到過(guò)濾柱CS（過(guò)濾柱放入收集管中），注意盡量不要吸出沉淀。
  注意：P3加入后應(yīng)立即混合，避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清。
6．12000rpm （~13400×g )離心2 min，小心地將離心后收集管中得到的溶液轉(zhuǎn)移到吸附柱CP3中（吸附柱放入收集管中），（如果過(guò)濾柱中有殘余的液體說(shuō)明步驟5吸取的上清中雜質(zhì)過(guò)多，可以延長(zhǎng)離心的時(shí)間；如果離心后收集管底部有少量的沉淀，盡量的吸取上清）。
7．12000rpm （~13400×g )離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP3放入收集管中。
8．向吸附柱CP3中加入500μl去蛋白液PD，12000rpm （~13400×g )離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP3放入收集管中。
9．向吸附柱CP3中加入600 μl漂洗液PW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000rpm（~13400×g )離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP3放入收集管中。
10．重復(fù)操作步驟9。
11．將吸附柱CP3放入收集管中，12000rpm （~13400×g )離心2 min，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR等）實(shí)驗(yàn)。為確保下游實(shí)驗(yàn)不受殘留乙醇的影響，建議將吸附柱CP3開蓋，置于室溫放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
12．將吸附柱CP3置于一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-100 μl洗脫緩沖液TB，室溫放置2 min，12000rpm （~13400×g )離心2 min，將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。
  注意：為了增加質(zhì)粒的回收效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，重復(fù)步驟12。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液，應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50 μl，體積過(guò)小影響回收效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。

低拷貝或大質(zhì)粒（>10 kb）提取：
如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10 kb的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，使用5-10 ml過(guò)夜培養(yǎng)物，同時(shí)按照比例增加P1、P2、P3的用量，洗脫緩沖液TB應(yīng)在65-70℃水浴預(yù)熱，在吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)時(shí)間，以增加提取效率。其它步驟相同。

根據(jù)您的關(guān)注的高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒，高純質(zhì)粒小提試劑盒，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：


BTN60403 紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化) 250mL
YT013 基因組DNA小量提取試劑盒(適用于動(dòng)物組織/細(xì)菌/昆蟲) 50次
WE0163 高純質(zhì)粒中提試劑盒 50次
WE0175 柱式小量血液基因組DNA提取試劑盒(0.1～20ml) 50次|200次
WE0187 土壤基因組提取試劑盒 50次
WE0205 磁珠法DNA純化回收試劑 5ml|50ml
WE0208 磁珠法血液DNA提取試劑盒 96次
WE0403 尿液DNA樣本保存管 20套

關(guān)注高純度質(zhì)粒微量提取試劑盒，高純質(zhì)粒小提試劑盒的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：土壤腐殖酸清除劑
貨號(hào)：BTN70603
規(guī)格：250mL
土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸，它們對(duì)PCR等后續(xù)反應(yīng)有大的抑制作用，所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環(huán)節(jié)。但是目前市場(chǎng)上沒有專門的產(chǎn)品，針對(duì)這一情況，百奧萊博開發(fā)了本產(chǎn)品，專門用于對(duì)提取DNA用的土壤進(jìn)行預(yù)處理，以清除腐殖酸成分。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 清除效果好，一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
2.適合于黃色、紅色、黑色和棕黑色等各種質(zhì)地的土壤和河海沉積物。
3. 操作過(guò)程簡(jiǎn)單快速，一次處理只需要10分鐘。
4.擴(kuò)容性好，可小規(guī)模操作，也可以大規(guī)模操作。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

使用及效果：
按每1克土壤加10mL本產(chǎn)的比例將樣品混合，振蕩3～5分鐘，3000-5000g室溫離心5分鐘，棄上清，沉淀可直接用于DNA提取。此操作可以多次重復(fù)。

圖注：比較水和本產(chǎn)品處理泥碳(腐殖酸含量大于60%)樣品的效果，C為用水處理后離心得到的結(jié)果，1-5是同一土壤樣品用本產(chǎn)品洗滌1-5后所得到的上清液。

圖注：用我司土壤DNA提取試劑(BTN60701)提取泥碳樣品所得到的DNA溶液，1號(hào)樣品所用土壤預(yù)先用水洗滌過(guò)三次，2號(hào)樣品預(yù)先用本產(chǎn)品洗滌過(guò)三次。

名稱：痰液采集器
貨號(hào)：BTN130938
規(guī)格：1個(gè)

名稱：土壤基因組提取試劑盒
貨號(hào)：WE0187
規(guī)格：50次
  本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的干燥土壤、濕泥、淤泥及海河沉淀物中提取總DNA。本產(chǎn)品使用安全方便，單個(gè)樣品操作一般可在40分鐘內(nèi)完成。使用本品每克土壤可獲得5μg以上的DNA，片段長(zhǎng)度主要在20-30 kb之間。本試劑盒采用獨(dú)特的溶液能夠有效去除雜質(zhì)和腐殖酸，通過(guò)優(yōu)化的緩沖系統(tǒng)使裂解液中的DNA結(jié)合到吸附柱上，土壤中殘留的雜質(zhì)、PCR和酶反應(yīng)的抑制劑可通過(guò)兩步洗滌步驟有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern Blot、分子標(biāo)記等下游實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組成：

組份	50次
Buffer SW	60ml
Buffer SL	30ml
Buffer GLS	30ml
Buffer PR(濃縮液)	13ml
Buffer GW1(濃縮液)	13ml
Buffer GW2(濃縮液)	15ml
Buffer GE	15ml
吸附柱DM及收集管	50套

自備試劑：無(wú)水乙醇，70%乙醇。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)：
1、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
2、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入無(wú)水乙醇。
3、使用前請(qǐng)檢查Buffer SL和Buffer GLS是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀，如有結(jié)晶或者沉淀，請(qǐng)將Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。

操作步驟：
1、取0.1 g-0.3 g土壤樣本，置于離心管(自備)中，加入1ml Buffer SW，渦旋振蕩1-3分鐘(須將管底的土壤震起來(lái))。12000rpm(～13400×g)離心1分鐘，倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇，渦旋振蕩1分鐘(須將管底的土壤震起來(lái))，12000rpm離心1分鐘，倒掉上清，用移液器將余液吸盡。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL，渦旋振蕩1-3分鐘(須將管底的土壤震起來(lái))，65℃水浴20分鐘(可每隔5分鐘渦旋振蕩5秒)，12000rpm離心3分鐘，將上清移至新的離心管(自備)中。
4、向上清液中加等體積Buffer GLS，顛倒混勻15-25次，冰上放置5分鐘。12000rpm離心5分鐘。
注意：冰上放置后液體可能會(huì)凝結(jié)，屬正常現(xiàn)象。
5、將步驟4中所得上清加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：若一次不能加完溶液，可分多次轉(zhuǎn)入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需進(jìn)一步提高DNA純度，可重復(fù)步驟8。
9、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR 等)。
10、將吸附柱置于一個(gè)新的離心管(自備)中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-100μlBuffer GE或滅菌水，室溫放置 2-5分鐘， 12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實(shí)驗(yàn)對(duì)pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調(diào)到此范圍)，pH值低于7.0時(shí)洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產(chǎn)量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產(chǎn)量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復(fù)步驟10；若洗脫體積小于100μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會(huì)減少總產(chǎn)量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因?yàn)楸４嬖谒械腄NA會(huì)受到酸性水解作用的影響，如需長(zhǎng)期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
6)基因組DNA模板中微量的殘余腐殖酸可能對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生不良影響。此時(shí)將DNA稀釋5-100倍問題通常即可解決。如經(jīng)稀釋后的DNA仍不能有效應(yīng)用于PCR反應(yīng)， 請(qǐng)使用腐殖酸清除劑，以獲得更的清除效果。

儲(chǔ)存條件：室溫(15～30℃)。

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