SY0001 蛋白酶K

產品簡介
蛋白酶K是高品質的DNA提取純化產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科學研究,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多蛋白酶K等DNA提取純化產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括蛋白酶K在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:蛋白酶K
英文名稱:Proteinase K
產品貨號:SY0001
產品規格:100mg|1g
Proteinase K(蛋白酶K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對分子量約為29.3 kDa,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實驗,變性劑如SDS(1%)可提高其活性,常用工作濃度為50-100μg/ml,根據所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。
產品特性
1)不含RNase和DNase;
2)來源于基因重組酵母菌株;
3)在尿素和SDS中穩定存在;
4)稀釋液:純水。
5)在較廣的pH范圍內(pH 4-12.5)均有活性,zuì佳pH范圍為pH 7.5-8.0
6)反應條件:反應緩沖液中37℃-56℃溫育1h;推薦反應溫度選擇50- 55℃;
7)活力單位定義:在37℃,pH7.5的條件下,每分鐘釋放1μM酪氨酸所需要的蛋白酶K量定義為1個活性單位。
8)失活方法:反應體系中加入PMSF或DFP抑制劑即可失活,65℃溫育10-15min可部分失活。
9)電泳純度:≥99%
10)酶活性值:≥30U/mg凍干粉
11)比活性值:≥40U/mg 蛋白
儲存條件
粉末4℃干燥保存,2年有效。粉末長期不用,可置于-20℃冷凍保存。儲存液需≤-20℃保存,避免反復凍融,短期使用可在4℃保存。
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)啟用后如需長期保存,需置于-20℃~-80℃冰箱冷凍或者過濾除菌。
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名稱:痰液DNA提取試劑盒
貨號:BTN111201
規格:50次
痰液是重要的檢測樣品,可以用于診斷肺癌,肺結核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手,為此本公司開發了本產品,專用于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA,用于后續的分子生物學分析。
產品特點:
1. 每次可以處理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 純度高,可直接用于后續得PCR檢測。
3.一管式操作,減少污染,節約成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取樣和運輸。
5. 環保,不需要使用苯酚和氯fǎng等有毒的有機溶液。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A(痰液細胞固定液) | 500ml |
| 溶液B(痰液解稠劑) | 500ml |
| 溶液C | 30ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。
使用方法:
一:痰標本的獲取與保存(注意:痰液以及下列操作的廢棄液都可能含有致病性的結核桿菌等致病菌,需按傳染源相關規定流程進行操作)
1. 每例患者在常規痰標本采樣時,zuì好連續三天采集三次樣品以防誤差。具體做法是先在每個50mL的痰液收集管內新鮮加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(約10-20mL),收集到裝有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集內,混勻后儲于4℃冰箱或陰涼處。第二、三天重復此操作。取足三管后一起送實驗室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用時,在室溫反復振搖裝有樣品(總體積約30-40mL)的痰液收集管5~10分鐘,充分混勻直到痰液中無粘稠痰塊而呈均勻的液相。
3. 4℃2500g離心5分鐘,棄上清。
4.沉淀再用自備的PBS液洗兩遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比較細胞形態學分析。也可以將細胞沉淀在0.2mL PBS緩沖液中重懸后轉入1.5mL螺旋蓋塑料離心管,-20℃冰箱長期保存,或立即用于下步的DNA提取。為避免蓋子崩開而出現交叉污染或痰液的分枝桿菌污染環境,建議不要使用壓蓋式塑料離心管。同時zuì好設置一個陽性和一個陰性對照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL樣品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加熱融化并搖晃均勻。
7.室溫放置10分鐘。此間可以在每個管外壁上做個標記,以在下步區別向心面和離心面。
8. 振蕩數秒后加入0.7mL自備的異丙醇,旋緊蓋后振蕩30秒混勻。
9. 把離心管的向心面對向轉頭,13,000-15000g室溫離心至少15分鐘。
10.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時可能看不見)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振蕩數秒后 15000g室溫離心5分鐘。注意:在離心機中放置離心管時將其向心面對向轉頭的中央。
12.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時呈膜狀沉淀)。
13. 將離心管放回離心機再短暫離心數秒,然后用移液器移棄約50μL殘留液體(70%乙醇),否則它會影響后續反應。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀DNA沉淀,溶液將呈混濁狀,含少量不溶,短暫離心后存上清(含DNA)。
15. 直接取適量用于PCR,樣品使用量不超過PCR體系的1/2。剩余DNA樣品可以室溫放置2小時,也可保存于-80℃保存一個月。
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