ALH286 10mM dNTP混合溶液
- 產(chǎn)品/服務(wù)：ALH286 10mM dNTP混合溶液
- 型 號(hào)：ALH286
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-04-19
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：891
產(chǎn)品簡介
10mM dNTP混合溶液是高品質(zhì)的核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要10mM dNTP混合溶液等核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括10mM dNTP混合溶液在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：10mM dNTP混合溶液
英文名稱：10mM dNTPs Solution
產(chǎn)品貨號(hào)：ALH286
產(chǎn)品規(guī)格：1ml|5ml
本品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩爾混合液，濃度均為10mM，PCR反應(yīng)時(shí),不用稀釋可直接使用，PCR反應(yīng)時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)使用量為每50μl反應(yīng)液使用1μl（終濃度200μM）
儲(chǔ)存條件：-20℃。
本制品別名：10mM dNTPs
根據(jù)您的關(guān)注的10mM dNTP混合溶液，10mM dNTPs，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：
名稱：PCR抑制物清除劑
貨號(hào)：BTN60804
規(guī)格：1mL
用血液、土壤、植物、中藥材等樣品中提取的DNA 經(jīng)常含有會(huì)抑制PCR的產(chǎn)物。本產(chǎn)品專門用于解除這些PCR 抑制劑的抑制作用，使DNA 能夠用于PCR擴(kuò)增。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 使用簡單，直接加入PCR反應(yīng)體系中使用。
2.適用范圍廣，可以用于解除血液、土壤、植物、中藥材等DNA樣品中的PCR 抑制劑。
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：將本產(chǎn)品按1：10的比例加入到PCR反應(yīng)體系中即可進(jìn)行PCR，如果PCR反應(yīng)體系為50μL，則需要加本產(chǎn)品5μL。
名稱：石蠟油，PCR級(jí)
貨號(hào)：BTN130841
規(guī)格：10mL
本產(chǎn)品是PCR級(jí)石蠟油試劑，專門用于PCR擴(kuò)增、WGA擴(kuò)增等實(shí)驗(yàn)時(shí)添加到反應(yīng)體系中，封閉反應(yīng)成分，防止溶液的揮發(fā)。
儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。
名稱：熱啟動(dòng)DNA聚合酶
貨號(hào)：WE0123
規(guī)格：500U|2500U
本產(chǎn)品是一種采用zuì新封閉技術(shù)的Taq DNA Polymerase，適用于HotStart PCR。在70℃以下，酶的活性中心被完全封閉，有效抑制了聚合酶活性，并能夠在低溫條件下有效抑制引物的非特異性退火及引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。在95℃條件下孵育5分鐘后，酶的部分活性得以釋放。隨著熱循環(huán)的不斷進(jìn)行，剩余的酶活會(huì)源源不斷地釋放出來，這就使得此酶克服了常規(guī)Taq酶容易出現(xiàn)平臺(tái)期的弊端，其擴(kuò)增效率大大提高。
本品進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，PCR產(chǎn)物3"末端附有一個(gè)“A”堿基，可直接用于T/A克隆。本產(chǎn)品具有擴(kuò)增速度快、特異性好、穩(wěn)定性好的特點(diǎn)，主要應(yīng)用于對擴(kuò)增產(chǎn)物要求量大的PCR和RT-PCR反應(yīng)。
產(chǎn)品組成：
| 組份 | 500U | 2500U |
| SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
注意：本產(chǎn)品的10×PCR Buffer中含有15 mM鎂離子。
活性定義：用活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物，在74℃，30分鐘內(nèi)，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸性不溶物質(zhì)所需的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。
質(zhì)量控制：
1、經(jīng)過多次柱純化，SDS-PAGE檢測其純度大于99%；
2、經(jīng)檢測無外源核酸酶活性；
3、PCR方法檢測無宿主殘余DNA；
4、能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。
使用方法：
以下舉例為以人基因組DNA為模板，擴(kuò)增1 kb的片段的PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。
1、PCR反應(yīng)體系
| 試劑 | 50μl反應(yīng)體系 | 終濃度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix，10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer，10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer，10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50 μ l |
| SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意： 可以在室溫下配制反應(yīng)液，zuì好將試劑置于冰上。引物濃度請以終濃度0.1-1.0μM作為設(shè)定范圍的參考。擴(kuò)增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
2、PCR反應(yīng)條件
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | |
| 變性 | 94℃ | 0.5-1 min | 25-35個(gè)循環(huán) |
| 退火 | 50-68℃ | 0.5-1 min | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min | |
| 終延伸 | 72℃ | 10 min |
注意：
1)一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度Tm低5℃，無法得到理想的擴(kuò)增效率時(shí)，適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應(yīng)條件。
2)延伸時(shí)間應(yīng)根據(jù)所擴(kuò)增片段大小設(shè)定，本產(chǎn)品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率為1 kb/min。
3)可根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的下游應(yīng)用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯(cuò)配機(jī)率會(huì)增加，非特異性背景嚴(yán)重。所以在保證產(chǎn)物得率的前提下應(yīng)盡量減少循環(huán)次數(shù)。
儲(chǔ)存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融。
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