WE0186 鼠尾基因組DNA提取試劑盒
- 產品/服務：WE0186 鼠尾基因組DNA提取試劑盒
- 型 號：WE0186
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-19
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：863
產品簡介
鼠尾基因組DNA提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優質的DNA提取純化產品，本制品用于生化實驗研究等領域，我公司專注于DNA提取純化產品的研發、生產和供應，為您提供的鼠尾基因組DNA提取試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括鼠尾基因組DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：鼠尾基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0186
產品規格：50次
本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的小鼠或大鼠鼠尾中提取高純度的總DNA。該試劑盒提供的方法簡單易行，純化過程無需苯酚或lǜ仿抽提，可獲得zuì大為50 kb的DNA片段，同時對100 bp的片段也能有效回收。本試劑盒采用獨特的裂解液，有效裂解鼠尾樣本，優化的緩沖體系使裂解鼠尾后產生的DNA結合到硅基質吸附柱上，而其他污染物可流過膜；PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可得到高純度的DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
試劑盒組成：
| 組份 | 50次 |
| Buffer GTT | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(濃縮液) | 13ml |
| Buffer GW2(濃縮液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25 mg |
| 蛋白酶K 儲存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自備試劑：無水乙醇
產品特點
1、專用于從大鼠或小鼠的鼠尾中分離純化高純度總DNA。
2、無需有機溶劑提取以及乙醇沉淀，徹底去除污染物及下游反應抑制物，快速提取高品質DNA。
實驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。
2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。
3、次使用前應按照試劑瓶標簽說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
4、使用前請檢查Buffer GL是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請將Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步驟：
1、取一段大鼠或兩段小鼠長度為0.4-0.6 cm的尾巴，在液氮中研磨成細粉或剪碎放入離心管(自備)中。加入180μl Buffer GTT，振蕩混勻。
注意：確保組織的起始量不要超出推薦范圍。
2、加入20μl 蛋白酶K ，渦旋振蕩，徹底混勻。
3、置于56℃水浴，直至組織溶液完全清澈，一般情況下需要消化6-8小時，孵育過程中渦旋震蕩，使樣品均勻分散。
注意：1)如果孵育和渦旋震蕩后仍然有膠狀物質，必要時過夜消化或再加入20μl 蛋白酶K 消化，不會影響后續操作。
2)如需去除RNA，在上述步驟完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(貨號：WE0225S)，震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
4、12000rpm(~～13400×g)離心1分鐘，以除掉未消化的類似于鼠毛等組織。將上清轉移到一個新的離心管(自備)中。
5、加入200μl Buffer GL，渦旋震蕩，充分混勻。加入200μl無水乙醇，渦旋震蕩，充分混勻。短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：
1)加入Buffer GL和無水乙醇后要立即渦旋震蕩混勻。
2)如果多個樣品一起操作，Buffer GL和無水乙醇可以等比例混勻后一起加入樣品。
3)加入Buffer GL和無水乙醇后可能會產生白色沉淀，不會影響后續實驗。
6、將步驟5中所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需進一步提高DNA純度，可重復步驟8。
9、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步目的是將吸附柱中殘余乙醇去除，乙醇殘留會影響后續酶促反應(酶切、PCR等)。
10、將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-200μlBuffer GE或滅菌水，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟10；若洗脫體積小于200μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
儲存條件：室溫(15～30℃)。
根據您的關注的鼠尾基因組DNA提取試劑盒，您可能還對以下產品有需求：
名稱：紅細胞裂解液A型(核酸純化)
貨號：BTN60403
規格：250mL
本品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細胞而基本不破壞白細胞和其他淋巴細胞的完整性。由于紅細胞是血液的主要細胞成份，不含DNA和RNA，其所含血紅素能抑制PCR反應，所以先用本產品裂解紅細胞，再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。
產品特點：
1.快速，一次處理只需要2-3分鐘。處理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白質。
2.，一次處理能裂解80%以上的哺乳動物紅細胞，一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴容性好，可以一次處理多達幾十毫升的樣品，也可以處理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以與市場上大多數血液DNA提取試劑盒結合使用。
儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
1.在裝有抗凝血液的離心管中，按1:1的比例加入紅細胞裂解液A型并輕柔顛倒混勻。
2. 5000-10000 g室溫離心2分鐘，小心吸棄棄上清。
3. 將細胞沉淀重懸于1/2 體積的紅細胞裂解液A型中，輕柔吹打混勻后5000-10000g室溫離心2分鐘。
4.沉淀即為去除了紅細胞的血液細胞，可以直接用于后續的實驗。
名稱：一管式植物DNA提取試劑盒
貨號：BTN60705
規格：50次
本試劑盒是一管式超快植物葉片和種子基因組DNA提取試劑，得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速，尤其適合于大規模的PCR篩選。
產品特點：
1.快速，整個過程只需要15分鐘左右，不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA沉淀。
2.一管式，在一個試管內完成所有操作，不容易交叉污染，。
3.裂解液可以直接用于PCR，剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4.便于高通量和自動化，適合于科研單位、海關和企業對葉片和種子進行大規模的PCR篩選。
5.適用于大多數植物葉片和種子。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B | 5ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
準備工作：溶液A有少量絮狀物，用前zuì好37℃水浴10分鐘使其溶解。
1.在0.5mL塑料離心管加入0.1mL溶液A。
2.將直徑約為0.5-0.7cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到溶液A中。葉片樣品可以用直徑為6毫米的辦公用打孔器獲得，葉片不需要搗碎。如果使用種子，需要先將種子敲碎，然后取一碎片(約1/4粒豌豆大小)直接使用。
3.95℃保溫10-15分鐘。如果保溫時間不夠，容易產生非特異擴增。
4.加入0.1mL溶液B，用手搖晃約10次混勻。
5.不離心而直接取上清液作為模版進行PCR，模板的體積占PCR體積的1/10為宜。
6.剩余樣品可以放4℃保存。
注意:本產品提取的DNA不能用電泳方法檢測。
疑難解答：
Q：為何PCR沒有擴增產物？
A：1.可能是植物的PCR抑制劑濃度較高，建議用TE將上清液稀釋5-10倍后再擴增。
2.建議使用已經優化好的PCR擴增條件。
3.建議使用百奧萊博PCR抑制物清除劑。
Q：用本產品是否跟Sigma的Extrac-N-Amp PCR Kit一樣含有PCR試劑？
A：本產品不含PCR試劑，但用戶可以選購百奧萊博的植物專一性PCR試劑盒(含植物專一性引物)或即用型PCR試劑盒(不含植物專一性引物)。
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