WE0205 磁珠法DNA純化回收試劑

產(chǎn)品簡介
磁珠法DNA純化回收試劑由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研目的,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價位合理,需要磁珠法DNA純化回收試劑等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括磁珠法DNA純化回收試劑在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:磁珠法DNA純化回收試劑
英文名稱:MagBeads DNA Purification Kit
產(chǎn)品貨號:WE0205
產(chǎn)品規(guī)格:5ml|50ml
本試劑提供了一種簡單、快速、的核酸純化方法。該產(chǎn)品可用于二代測序建庫時DNA的選擇性或非選擇性回收,以及PCR產(chǎn)物的純化回收。MCPure與樣品按一定比例混合后,磁珠選擇性將核酸吸附。經(jīng)兩步漂洗后,洗脫得到的DNA純度高,A260/A280的比值在 1.7-1.9之間, A260/A230的比值通常在2.0以上。經(jīng)該試劑盒純化得到的DNA適用于PCR,Real-Time PCR, 測序,southern blotting等實驗。
試劑盒組成:
| 組份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(濃縮液) | 72ml |
| Buffer KCW2(濃縮液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 儲存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自備儀器及試劑:磁力架|80%乙醇|洗脫液:Buffer EB(10 mM Tris-HCl, pH 8.0);去離子水(pH在7.0-8.0之間)。
產(chǎn)率舉例:
| 片段長度 | 典型產(chǎn)率 |
| 5000 bp | 高至90% |
| 1000 bp | 高至90% |
| 500 bp | 高至80% |
| 200 bp | 高至70% |
實驗前準備及重要注意事項:
1、冰凍、離心、超聲會對MCPure中的磁珠造成不可逆的損害。
2、MCPure中磁珠長期放置后會聚集成團,從而使磁珠表面積減小,降低樣品回收得率,使用前一定要渦旋振蕩徹底混勻磁珠。
3、使用前,建議將MCPure渦旋震蕩混勻后分裝到1.5ml的離心管中,每管分裝1mlMCPure。
4、本試劑不適用于純化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100 bp的DNA片段,建議將MCPure的用量增加到樣品體積的4倍。
5、進行DNA的選擇性回收時,MCPure對于DNA溶液中的離子濃度較為敏感。不同廠家的二代測序建庫試劑得到的接頭連接后的DNA溶液以及PCR擴增產(chǎn)物中離子濃度不同,所以用MCPure做DNA選擇性回收時,試劑用量有所不同。
操作步驟:
1、渦旋振蕩MCPure 20秒,使其徹底混勻為均一溶液。
2、向1.5ml的離心管中加入純化的DNA溶液。
3、向上一步的離心管中加入2倍樣品體積的MCPure,渦旋震蕩5秒后室溫靜置5分鐘。
4、將上一步的離心管放于磁力架上,直至磁珠完全吸附(約需5分鐘)。
5、保持離心管固定于磁力架上,徹底棄去溶液,期間避免接觸磁珠。
6、繼續(xù)保持離心管固定于磁力架上,向離心管中加入250μl新鮮配置的80%乙醇。
7、保持離心管固定于磁力架上,待懸起的磁珠完全吸附后徹底棄去乙醇。
8、重復(fù)步驟6-7兩次。
9、保持離心管固定于磁力架上靜置放置10分鐘,使乙醇完全揮發(fā)干凈。
10、將離心管從磁力架上取下,加入20-100μl EB(自備)或去離子水,渦旋振蕩使磁珠完全重懸于洗脫液中后,室溫放置5分鐘。
11、將離心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(約需5分鐘)。
12、將洗脫液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5ml離心管中。此時,可棄去磁珠。
純化回收得率的計算:
我們建議通過瓊脂糖電泳純化前后的樣品進行回收得率的計算。我們不建議通過260 nm處的光吸收值來計算回收得率。因為溶液中單鏈、雙鏈DNA和dNTP以及一些純化前的某些雜質(zhì)在260 nm處都有光吸收,這樣在計算回收前樣品中DNA濃度時會得到一個假的、虛高的DNA濃度。
儲存條件:室溫(15~30℃)
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