ALH091 大型質粒大量提取試劑盒

產品簡介
北京百奧萊博供應的大型質粒大量提取試劑盒用于生化實驗研究等領域,本品質量穩定,價位合理,需要大型質粒大量提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括大型質粒大量提取試劑盒(>10kb質粒)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:大型質粒大量提取試劑盒(>10kb質粒)
英文名稱:Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
產品貨號:ALH091
產品規格:20次
本試劑盒適用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型質粒制備。常規的離心柱型質粒抽提試劑盒并不適用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型質粒DNA的抽提。這主要是因為大型質粒DNA分子量很大,常常會超過100kb而且一般拷貝數低產量低,使用常規的離心柱吸附膜吸附效率和產量很低而且過膜會打斷這些大分子量的質粒DNA。本試劑盒采用改進堿裂解法從培養菌中提取質粒DNA,采用獨特的溶液配方和內毒素清除試劑,只需要幾次簡單離心去除蛋白質、多糖、內毒素、RNA等雜質,獲得高質量的質粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質??芍苯討糜诩毎D染甚至動物體內實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在Eppendorf管中操作,方法簡單,不需特殊設備,無需過柱,不用酚氯fǎng抽提;基本可完全回收細菌裂解釋放出的質粒,不必擔心質粒DNA的丟失。本方法提取純化質粒DNA,對質粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質粒或型BAC/PAC質粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化。此外溶液型的試劑可以按照比例放大縮小進行小提/中提/大提,zuì后可選擇任意小體積溶解質粒,濃度可高達3μg/μl。
試劑盒組份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
雜質清除劑A-——————————3ml
雜質清除劑B-——————————30ml
內毒素清除劑——————————10ml
試劑盒特點:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯fǎng等試劑,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、從150-200 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養液中,可快速提取0.4-1mg純凈的高拷貝質粒DNA,提取率達80-90 %。
2.獲得的質粒產量高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
3.內毒素含量低(<0.1 EU/μg DNA),可直接應用于細胞轉染。
注意事項
1. 提取的質粒量與細菌培養濃度、質粒拷貝數等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb 的大質粒,應加大菌體使用量,同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大質粒時操作動作要輕柔,應該使用剪大了開口的吸頭,防止機械剪切對DNA 的損壞。
3. DNA 沉淀液沉淀離心后,可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀,擔心DNA 丟失,可保留上清液,待完成全部操作后電泳鑒定,以確定是否獲得終產物(數百微克DNA 離心沉淀在管的側壁上,可能無法看到明顯團塊)。
4. 得到的質粒DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1 相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶,也可能為2 條或者多條DNA 條帶,這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成,與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過95%。
5. 質粒DNA 確切分子大小, 必須酶切線性化后,對比DNA 分子量Marker 才可以知道。處于環狀或者超螺旋狀態的質粒,泳動位置不確定,無法通過電泳知道確切大小。
儲存條件:室溫,有效期18個月。
本制品別名:大型質粒提取試劑盒|大型質粒大量制備試劑盒|無內毒素大型質粒提取試劑盒|轉染級質粒大量提取試劑盒|細胞轉染用大型質粒制備試劑盒|BAC大型質粒提取試劑盒|PAC大型質粒提取試劑盒|P1大型質粒提取試劑盒|Cosmid大型質粒提取試劑盒
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名稱:土壤腐殖酸清除劑
貨號:BTN70603
規格:250mL
土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸,它們對PCR等后續反應有大的抑制作用,所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環節。但是目前市場上沒有專門的產品,針對這一情況,百奧萊博開發了本產品,專門用于對提取DNA用的土壤進行預處理,以清除腐殖酸成分。
產品特點:
1. 清除效果好,一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
2.適合于黃色、紅色、黑色和棕黑色等各種質地的土壤和河海沉積物。
3. 操作過程簡單快速,一次處理只需要10分鐘。
4.擴容性好,可小規模操作,也可以大規模操作。
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。
使用及效果:
按每1克土壤加10mL本產的比例將樣品混合,振蕩3~5分鐘,3000-5000g室溫離心5分鐘,棄上清,沉淀可直接用于DNA提取。此操作可以多次重復。

圖注:比較水和本產品處理泥碳(腐殖酸含量大于60%)樣品的效果,C為用水處理后離心得到的結果,1-5是同一土壤樣品用本產品洗滌1-5后所得到的上清液。

圖注:用我司土壤DNA提取試劑(BTN60701)提取泥碳樣品所得到的DNA溶液,1號樣品所用土壤預先用水洗滌過三次,2號樣品預先用本產品洗滌過三次。
名稱:柱式軟體動物DNA提取試劑盒
貨號:BTN101111
規格:50次
本試劑盒是專門用于從各種軟體動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于陽離子去垢劑CTAB在適當的離子強度條件下,特異地跟基因組DNA 結合形成沉淀,然后在用硅膠膜技術進行進一步純化。
產品特點:
1.適用于用常規方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動物動物,包括螺類、貝類、烏賊、章魚和蝸牛等。
2. 提取到的基因組DNA 完整性,其中zuì長可以到達長度一般在20-50kb。
3. DNA 純凈,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
4. 操作簡單,整個過程約30分鐘。
5. 安全,本試劑盒對人體,無腐蝕性和刺激性氣味。
6. 價廉物美,與國外同類產品相比質量相當,但價格。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 100ml |
| RNase A(10mg/mL) | 150μl |
| 離心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脫液2.0 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。
使用方法:
1. 勻漿方法一:稱取0.1-0.3g軟體動物組織,轉移到塑料研缽中,液氮研磨成粉后轉移到一個干凈的1.5mL塑料離心管中。注意:zuì好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽,因為DNA 會吸附在表面,影響得率。在離心管中加入1mL 65℃預熱的溶液A并用移液槍頭充分吹打混勻(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。進入第三步。
2. 勻漿方法二:將0.1-0.3g軟體動物組織剪成小塊,轉移到10-15mL塑料管中(培養細菌那種離心管即可),加入1mL 65℃預熱的溶液A,用Polytron 式勻漿機(剪切式勻漿機)勻漿1分鐘左右。
3. 65℃保溫5-30分鐘,其間zuì好吹打混勻2-3次。
4.轉移到新的1.5mL離心管中,12000~15000g室溫離心3分鐘。
5. 將不超過0.75mL的上清轉移到新離心管中。有時候上清液中還會有少量細小懸浮物,但對后續操作沒有影響,不必進行特殊處理。
6.在上清液中加入等體積的溶液B,上下顛倒30秒充分混勻,溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000~15000g室溫離心3分鐘,轉移上清到新的1.5mL塑料離心管中。
9. 加入0.2mL的氯fǎng(自備),震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
10. 12000~15000g室溫離心3分鐘,兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉移上清到新1.5-5mL塑料離心管中。注意:由于下一步要加1.5倍體積的溶液C,所以新的離心管的體積要足夠大。
11. 加入1.5倍體積的溶液C,上下顛倒30秒混勻,然后分多次的將混合液轉移到離心吸附柱中。
12. 每次轉移0.7-0.8mL 混合液后,室溫放置5-10分鐘。
13. 12000~15000g室溫1分鐘,棄穿透液。
14. 對需要多次上柱的樣品,可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中,重復第12-14 步的操作。
15. 將0.7mL 通用洗柱液加入離心柱,室溫離心1分鐘,棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌)。
17. 空甩1分鐘去除殘留液體。
18. 將離心柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中,加入30-100μL DNA 洗脫液2.0。
19.室溫放置5分鐘后離心1分鐘,管底即為軟體動物DNA溶液,可立即使用,也可長期保存在-20℃。
20.可以重復上步一次,以洗脫更多的DNA(第二次洗脫的DNA一般有次的30%左右)。
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