YT477 N端mCherry標簽融合蛋白質
- 產品/服務：YT477 N端mCherry標簽融合蛋白質
- 型 號：YT477
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：977
產品簡介
N端mCherry標簽融合蛋白質由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品用于科研試驗，我公司專注于克隆與表達產品的研發、生產和供應，為您提供的N端mCherry標簽融合蛋白質質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括N端mCherry標簽融合蛋白質粒(紅色熒光蛋白)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：N端mCherry標簽融合蛋白質粒(紅色熒光蛋白)
英文名稱：N-mCherry plasmid（with CMV promoter）
產品貨號：YT477
產品規格：1μg
本質粒是哺乳動物細胞表達質粒，用于表達N端含mCherry (DsRed的突變體，一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質粒含有CMV啟動子，可以啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的前面有一個mCherry的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據閱讀框插入目的基因就可以表達N端含有mCherry標簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內定位，也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后，可以使用G418篩選穩定表達目的蛋白的細胞株。
本質粒質粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| mCherry | 677-1384 |
|
Multiple clo | 1385-1474 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1494-1515 |
| SV40 polyA signal | 1527-1910 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2048-2354 |
| bla promoter | 2379-2503 |
| SV40 promoter | 2523-2861 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2896-3687 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3688-4146 |
| pUC origin | 4275-4942 |
本質粒(4994bp)的圖譜如下：
使用說明：
1. 次使用時請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 本質粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，構建的質粒可以用常規方法轉染細胞。
儲存條件：-20℃。
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名稱：平末端DNA加A試劑盒
貨號：BTN60105
規格：50次
本產品利用Taq DNA polymerase的不依賴于模板的末端轉移酶活性，在只有dATP 存在的情況下，在平末端的DNA片段加上一個dA 尾巴，使平末端片段也能被T載體克隆。其流程圖如下：
產品特點：
1. 簡單，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.產物可以直接用于與T載體的連接。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×Tailing Buffer | 1.25ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：反應前純化處理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶擴增得到的DNA片段，必須經過徹底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K處理)，否則它們將在加A反應時，切除掉加上的A尾巴，干擾反應。可以采取膠回收和酚/氯fǎng抽提法等常規方法純化，zuì后溶解在水或TE中，終濃度以0.1μg/μL為宜。
二：加A反應
在干凈的0.5mL或1.5mL離心管中，分別加入下列成分：
| 回收的DNA片段 | 0.2-2ug |
| 2×dA Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 補水到 | 50μL |
| 72℃保溫2小時 | |
三：反應后處理
加A反應后，Taq DNA pol
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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