HR0489 MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒

產品簡介
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質的細胞凋亡與增殖產品,本制品用于生化實驗研究等領域,本品質量穩(wěn)定,價位合理,需要MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒等細胞凋亡與增殖產品的客戶,請到我公司官網聯(lián)系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒
產品貨號:HR0489
產品規(guī)格:250T|500T|1000T
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒是應用的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),內鹽;MTS]快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。
MTS被細胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物,新陳代謝活躍的活細胞內的脫氫酶類將MTS轉化成液態(tài)可溶的甲臢化合物,這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量,而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產物的數量與培養(yǎng)物中活性細胞的數量成正比。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數量呈線性關系。
MTS溶液可以直接加入到細胞樣品中,不需要預配各種成分,MTS溶液很穩(wěn)定,對細胞沒有毒性,可以長時間孵育細胞。MTS法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數目的靈敏度高,無放射性,檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。
儲存條件:2-8℃避光保存。長期不用的分裝后于-20℃避光保存,避免反復凍融。
有效期:一年。
注意事項:
●本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
● 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
● 需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。zuì好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
●用培養(yǎng)基或PBS來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有MTS的待測藥物溶液在490nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μl MTS 進行檢測。
● 細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
● 加MTS溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育1小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
● 如果不是使用96孔板檢測,MTS溶液的用量相應等比例增加即可。
特點:
● 易于使用:直接將MTS溶液,加入到細胞中,孵育然后讀取吸光度值。
●快速:在96孔板中進行檢測,不需洗滌或收獲細胞。也不需要溶解步驟。因為MTS甲臢產物可溶解在組織培養(yǎng)基中。
● 非放射性:不需液閃混合液,不需處理放射性廢物(不像[3H]-胸腺嘧啶)。
● 靈活:平板被讀數后還可以放回溫箱繼續(xù)顏色反應(不像MTT)。
● 安全:不需要揮發(fā)性有機溶劑來溶解甲臢化合物(不像MTT)。
應用:
● 細胞增殖;細胞毒性;凋亡結果
● 化學靈敏性
● 細胞貼附確定;趨化性
活性測定使用方法:
1.收集細胞,加細胞懸液100μl(約5000-10000個細胞)到96孔板(邊緣孔用無菌水或PBS 填充)。每板設對照(加100μl培養(yǎng)基)。
2.置37℃,5% CO2孵育過夜,倒置顯微鏡下觀察。
3.每孔加入10μl待檢測藥物溶液,37℃孵育。
4.每孔加入10μl MTS溶液,37℃孵育1-4小時。
5.測定490nm各孔的吸光值。
6.同時設置空白孔(培養(yǎng)基和MTS溶液,無細胞),對照孔(不加藥培養(yǎng)基和MTS溶液,有細胞),每組設定3-5 復孔。
結果分析:
細胞活力計算:
將各測試孔的OD 值減去調零孔OD值或對照孔OD值。各重復孔的OD值取平均數。
細胞活力% =(加藥細胞OD-空白OD/對照細胞OD-空白OD)×100
數量測定使用方法:
1.先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,然后接種細胞。
2.按比例(例如:1/2 比例)依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做3-5個細胞濃度梯度,每組3-6個復孔。
3.接種后培養(yǎng)2-4小時使細胞貼壁,然后加MTS試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD值,制作出一條以細胞數量為橫坐標(X軸),OD值為縱坐標(Y軸)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量 (使用此標準曲線的前提條件是實驗的條件要一致,便于確定細胞的接種數量以及加入MTS后的培養(yǎng)時間)。
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