BTN160692 內毒素清除試劑盒

產品簡介
內毒素清除試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學研究方面,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多內毒素清除試劑盒等DNA提取純化產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括內毒素清除試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:內毒素清除試劑盒
英文名稱:Endotoxin removing Kit
產品貨號:BTN160692
產品規格:1.5mL
本試劑盒使用的是一類內毒素清除樹脂,它以修飾過的多粘菌素B(PMB)為配體,進行特異性的內毒素清除。經此專用親和介質純化,樣品zuì終的內毒素水平可低于0.1 EU/mL。
細菌內毒素(脂多糖,LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分。人們在研究革蘭氏陰性菌血癥和內毒素血癥的過程中,發現細菌內毒素在其中起著關鍵的作用,內毒素使機體免疫功能嚴重受損,進一步的發展可能引發膿毒性休克,彌散性血管內凝血,急性呼吸窘迫綜合癥,全身炎癥反應綜合癥或致命性多器官功能衰竭。因此,內毒素的清除對于人類疾病治療的注射型藥品、生物制品等都是必須的,尤其對于基因藥物、蛋白藥物、單抗克隆藥物、治療性疫苗、小分子化學藥物等生物制品的下游純化處理來說就顯得非常重要。
試劑盒特點:
1.高穩定性,高去除效率。
2.高結合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范圍為5-10時,親和介質對內毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8時,清除效率zuì高。
4. 無需恒流泵即可調節流速。
5. 重復使用 5次不會改變柱子效果。
6. 使用方便,試劑盒中提供無熱原緩沖液,無熱原收集管及無熱原槍頭等。
7.適合純化對象為蛋白,多肽,抗體,多糖等。
8.可耐受試劑:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐溫-20,10mM DTT等。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 專用親和介質 | 1.5mL預裝柱 |
| 再生緩沖液 | 125ml |
| 平衡緩沖液 | 125ml |
| 流速控制器 | 1個 |
| 無熱原接收管 | 1 包(3 支/包) |
| 無熱原槍頭(1mL) | 2 包(6 支/包) |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.樣品處理:樣品的pH值和離子強度在內毒素去除的過程中起著重要作用。雖然結合內毒素的pH范圍在6-9,但是7-8的pH范圍是純化的zuì佳范圍。合適的離子濃度可以降低非特異性吸附,0.15-0.5 M NaCl的條件可以得到一個很好的去除效率和低的樣品損失。所以,純化之前可以使用處理過的氯化鈉,0.1 M的氫氧化鈉或0.1 M鹽酸來調節離子強度或pH值。
2.活化親和介質:將預裝柱置于鐵架臺,垂直固定,去除預裝柱頂部的蓋子,打開流速控制器,使保護液在重力作用下流干,加入5mL的(預冷)再生緩沖液,調節流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生緩沖液流干,再加入5mL 再生緩沖液,再重復操作兩次,確保體系保持無熱原(即內毒素)存在。即使是次使用也必須進行這一步操作。這步操作大約需要60分鐘完成。
3. 平衡親和介質:活化完畢后,加入6mL的(預冷)平衡緩沖液,調節流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡緩沖液,再按此操作重復兩次。這步操作大約需要40分鐘完成。
4.內毒素清除:將流速控制器關閉,使用無熱原槍頭將樣品加入,打開控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液體積達到1.5mL后,使用無熱原接收管接受樣品,樣品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(預冷)平衡緩沖液淋洗,收集淋洗液。檢測樣品濃度及內毒素水平。
5. 再次使用:如果流出樣品內毒素水平未能達到預期值,需要將預裝柱重新再生,按照步驟1 重新再生,然后上樣純化。
6. 儲存條件:如果預裝柱用完后需要保存,先用10mL 平衡緩沖液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生緩沖液(含0.02%的疊氮化鈉)。
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規格:50次
痰液是重要的檢測樣品,可以用于診斷肺癌,肺結核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手,為此本公司開發了本產品,專用于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA,用于后續的分子生物學分析。
產品特點:
1. 每次可以處理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 純度高,可直接用于后續得PCR檢測。
3.一管式操作,減少污染,節約成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取樣和運輸。
5. 環保,不需要使用苯酚和氯fǎng等有毒的有機溶液。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A(痰液細胞固定液) | 500ml |
| 溶液B(痰液解稠劑) | 500ml |
| 溶液C | 30ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。
使用方法:
一:痰標本的獲取與保存(注意:痰液以及下列操作的廢棄液都可能含有致病性的結核桿菌等致病菌,需按傳染源相關規定流程進行操作)
1. 每例患者在常規痰標本采樣時,zuì好連續三天采集三次樣品以防誤差。具體做法是先在每個50mL的痰液收集管內新鮮加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(約10-20mL),收集到裝有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集內,混勻后儲于4℃冰箱或陰涼處。第二、三天重復此操作。取足三管后一起送實驗室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用時,在室溫反復振搖裝有樣品(總體積約30-40mL)的痰液收集管5~10分鐘,充分混勻直到痰液中無粘稠痰塊而呈均勻的液相。
3. 4℃2500g離心5分鐘,棄上清。
4.沉淀再用自備的PBS液洗兩遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比較細胞形態學分析。也可以將細胞沉淀在0.2mL PBS緩沖液中重懸后轉入1.5mL螺旋蓋塑料離心管,-20℃冰箱長期保存,或立即用于下步的DNA提取。為避免蓋子崩開而出現交叉污染或痰液的分枝桿菌污染環境,建議不要使用壓蓋式塑料離心管。同時zuì好設置一個陽性和一個陰性對照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL樣品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加熱融化并搖晃均勻。
7.室溫放置10分鐘。此間可以在每個管外壁上做個標記,以在下步區別向心面和離心面。
8. 振蕩數秒后加入0.7mL自備的異丙醇,旋緊蓋后振蕩30秒混勻。
9. 把離心管的向心面對向轉頭,13,000-15000g室溫離心至少15分鐘。
10.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時可能看不見)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振蕩數秒后 15000g室溫離心5分鐘。注意:在離心機中放置離心管時將其向心面對向轉頭的中央。
12.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時呈膜狀沉淀)。
13. 將離心管放回離心機再短暫離心數秒,然后用移液器移棄約50μL殘留液體(70%乙醇),否則它會影響后續反應。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀DNA沉淀,溶液將呈混濁狀,含少量不溶,短暫離心后存上清(含DNA)。
15. 直接取適量用于PCR,樣品使用量不超過PCR體系的1/2。剩余DNA樣品可以室溫放置2小時,也可保存于-80℃保存一個月。
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