SY0624 植物組培抗菌劑

產品簡介
植物組培抗菌劑的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質的培養(yǎng)基配套試劑產品,本制品用于科研目的,本品質量穩(wěn)定,價位合理,需要植物組培抗菌劑等培養(yǎng)基配套試劑產品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括植物組培抗菌劑在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:植物組培抗菌劑
英文名稱:Plant Preservative Mixture (PPM)
產品貨號:SY0624
產品規(guī)格:25ml|100ml
植物組織培養(yǎng)可以依階段區(qū)分為:一、引發(fā)愈傷組織( callus ),因為只有callus可以進行組織培養(yǎng)。 二、從callus誘導成根或芽。組培的方式可以分為3種:1)固體培養(yǎng),將植物組織放置于固體培養(yǎng)基上,通常培養(yǎng)在玻璃瓶或塑膠瓶內。2)平板培養(yǎng),將植物組織埋于固體培養(yǎng)基中,并且培養(yǎng)在培養(yǎng)皿。3)液體培養(yǎng),將植物組織培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中,一般來說培養(yǎng)在生物反應器內,可以再細分為靜止培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)和漂浮培養(yǎng)。在整個組織培養(yǎng)的過程,zuì擔心的就是微生物的污染,所以用于植物組織培養(yǎng)的抗菌與抗真菌劑是非常必須的。
植物組培抗菌劑(Plant Preservative Mixture, PPM)是一種廣譜抗微生物劑,可以殺死細菌和真菌細胞,防止真菌孢子的萌發(fā),并在較高濃度下能消除內源性污染的外植體。研究表明PPM活性成分可以穿透真菌或細菌細胞壁,抑制檸檬酸循環(huán)和電子傳遞鏈等中心代謝循環(huán)中的關鍵酶的活性,并且可以抑制培養(yǎng)基中的單糖和氨基酸向真菌和細菌細胞的運輸。PPM能有效地抑制植物細胞和植物組織培養(yǎng)中的通過空氣、水、人傳播的微生物污染及內源性污染,而不會影響體外種子發(fā)芽、愈傷組織增殖和愈傷組織的再生。
與普通的抗生素相比,體現(xiàn)在:
1)是一種廣譜、抗菌/抗真菌劑。
2)比常用抗生素價格更低廉,可以作為植物組織培養(yǎng)基的標準成分,并可作為常規(guī)使用。
3)因為它的靶標是抑制多種酶,所以產生抗耐藥性的突變體是不可能的。
4)具有熱穩(wěn)定性,可以和培養(yǎng)基一起滅菌。
使用方法
以下所述的操作流程是通用的,可能需要根據(jù)待處理的特定物種稍作改動。
1)含有PPM的培養(yǎng)基可以在超凈臺外面分裝,即無需無菌操作,等瓊脂凝固后把蓋子蓋好。如果用泵來分裝培養(yǎng)基,建議在分裝前后先用高壓滅菌處理的熱水清理導管/軟管。
2)如果儲存在無菌容器或在此之前儲備液未受污染,含PPM的熱敏感或熱穩(wěn)定的液體培養(yǎng)基無需經微孔濾膜或高壓滅菌處理。但是對于含有200 mg/L或更多氨基酸或蛋白質的富集培養(yǎng)基,建議加入PPM后用濾膜過濾處理。
3)超凈工作臺里的器具(鑷子或解剖刀)無需在火焰上燒,只要定期地在70%酒精里蘸一下即可。超凈工作臺無需驗證,可以在超凈工作臺外面的干凈臺面上操作,不超過一小時即可。
4)PPM溶液呈酸性,pH 3.8,需保存在4℃。低接種密度下推薦工作劑量0.05-0.2%(v/v),可在滅菌前或滅菌后加入培養(yǎng)基,防止通過空氣傳播污染或內源性污染。處理內源性污染或獲得無農桿菌的植物材料需要高劑量的PPM。
5)對于一些常規(guī)情況下表皮上被大量細菌或真菌孢子污染的種子來說,PPM的抗菌效率可能比較弱。對于體外萌發(fā)實驗,種子應該按照傳統(tǒng)的方法先用漂白劑進行表面消毒。因此,在含有PPM的萌發(fā)培養(yǎng)基里,在一個非滅菌的容器中種子可以在自來水下沖洗然后在超凈臺中吹干。如果所使用的器具末端接觸到活性細菌、真菌組織或其它懷疑被污染的東西,這些器具應該通過高壓或電子加熱設備進行滅菌。
6)一般劑量水平:
除了內源性污染以外,推薦劑量是0.05-0.2%。對于愈傷增殖、器官形成和胚胎形成,推薦的劑量范圍是0.05-0.075%。低接種密度或者處理緩慢生長的細菌條件下,在培養(yǎng)基滅菌前或滅菌后加入此劑量的PPM,可防止空氣傳播的污染和內源性污染。要消除更高密度的內源性污染,需要增加PPM的劑量(參考7-內源性污染)。
7)內源性污染
a. 對于外植體:以1cm(或更短)外植體為例,添加4~5% PPM到完全MS基礎鹽中,但千萬不要添加Tween 20和 pH調整劑,攪拌4~12小時之后直接拿出。不用清洗,直接插入含有PPM的培養(yǎng)基里,若是草本植物換至0.05~0.1%PPM的萌發(fā)培養(yǎng)基即可;而木本植物則換至0.2% PPM的萌發(fā)培養(yǎng)基。
注意:以下從第7段(b)到10用于觀賞植物。
b. 對于塊莖,球莖和鱗狀物:把整個塊莖/球莖/鱗狀物在漂白劑里搖或攪拌。然后用水沖洗(可以在非無菌條件下操作)。把塊莖/球莖切成小片,在含有4-5%PPM的全基鹽中搖或攪拌12-24 h,不要加pH調整劑和Tween 20。不用沖洗直接插入到含有0.1-0.2% PPM的培養(yǎng)基中。
8)如果按照以上操作流程沒有取得滿意的結果(尤其是厚的和非常密集的外植體、種子),我們建議按照以下流程:
a. 在水中搖或攪拌外植體(較軟的組織1h,較堅硬的組織2h);
b. 在含有50% PPM的完全MS基礎鹽中(不加pH調整劑和Tween 20)搖或攪拌5-10 min。
c. 無需沖洗,直接把處植體插入到培養(yǎng)基中。如果真菌污染,可以選擇額外再加入PPM到培養(yǎng)基中。
然而,對于細菌或混合污染,個月在培養(yǎng)基中加入0.05-0.2%的PPM是必要的。不要丟棄高度氧化的外植體,因為大約50%的外植體在4-6周內即可恢復正常。
9)為了消除“組培中”污染的植物材料(搶救措施):
注意:僅適合明顯觀察到受污染不超過一周的組織。
a. 在自來水細水流下面用牙刷清洗材料。在含有50% PPM(用滅菌水稀釋)中搖或攪拌5-15 min。對于細菌或混合污染,我們建議用低pH值2.8-3.2的溶液,即 PPM與0.6g/L的檸檬酸溶液(用滅菌水)按1:1混合。
b. 不用沖洗直接把處理好的材料插入到含有0.05-0.2% PPM的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)至少一個月。前10天弱光培養(yǎng),如上所提,不要丟棄高度氧化的外植體,等4-6周以后將約有50%的材料恢復。
對于真菌孢子或細菌位于外植體深的部位,而PPM無法接觸到的情況,需要把材料在水中浸泡一段時間,然后沿著外植體切片,在50% PPM中搖或攪拌5-15 min。通過以上消毒步驟,保證PPM能夠充分接觸到外植體的整個表面。
10)去除農桿菌:
共培養(yǎng)之后,用水沖洗葉盤。然后把轉染的葉盤在含有 PPM的完全基礎鹽中蘸(整個葉盤)約2 min。 用兩張無菌紙巾吸干放到含有常用抗生素的培養(yǎng)基上。三周后,轉到只含有0.05-0.075% PPM的培養(yǎng)基上。
注意事項
1)采用PPM消毒后次轉移的材料,我們建議把外植體完全地插入半固體培養(yǎng)基中。
2)50% PPM溶液能重復利用大約5-10次。重復利用的次數(shù)取決于所處理外植體的體積和接種密度。保存50% PPM在4℃以延長它的活性。如有必要,準備兩種PPM消毒液:一種是滅菌內源性污染,第二種是滅菌“組培中”的污染。用第二種消毒溶液處理材料后都要用0.2 μm的濾膜濾滅,濾滅過程可以非無菌條件下完成。一個濾器能用于溶液濾滅的整個過程。
3)如果用50% PPM處理材料效果仍不佳,可以用 PPM。處理方法跟50% PPM相似,但處理時間不要超過10 min。
4)PPM 的使用為任何一個組織培養(yǎng)實驗室?guī)肀憷⒋蟮靥岣呒夹g人員和實驗室的工作效率。但每個實驗室的工作條件不同可能使得PPM效力的發(fā)揮具有一定的波動性。建議工作人員根據(jù)以上步驟操作的前提下,并進行優(yōu)化調整以確認PPM效力發(fā)揮的zuì佳工作條件,或者確認PPM是否能滿足其特定的應用要求。整體來說,PPM是能夠非常有效的預防植物樣本受到的空氣污染,水介質污染以及人源接觸帶來的各種污染。使用得當,PPM可以拯救內源性污染的外植體;推薦劑量(0.05-0.2%(v/v))下PPM幾乎不造成任何負面損傷。
儲存條件:4℃
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名稱:玉米素
貨號:SY0616
規(guī)格:10mg|100mg
玉米素(Zeatin)是存在于高等植物的一種天然植物細胞分裂素(cytokinins, CKs),zuì初是從幼嫩的玉米芯中發(fā)現(xiàn)分離出來的,后來椰汁中也發(fā)現(xiàn)該物質及其衍生物。作為細胞生長調節(jié)劑,功能上不僅促進側芽生長,刺激細胞分化(側端),促進愈傷組織和種子發(fā)芽,還能防止葉片衰老,逆轉芽部受到的毒素傷害和抑制過度根部形成。高濃度的玉米素還能產生不定芽分化。
玉米素在結構上有順、反兩種異構體,反式異構體具有很強的生物活性,順式異構體活性比較弱。本品是兩種異構體的混合物,純度>98%,適用于植物組織培養(yǎng)。
中文別名:N6-(4-羥基-3-甲基-2-丁烯)腺嘌呤
英文別名:6-(4-Hydroxy-3-methyl-but-2-enylamino)purine
CAS:13114-27-7
分子式:C10H13N5O
分子量:219.24
外觀:白色晶體或粉末
熔點:207~208℃
溶解性:溶于1M醋酸和1M NaOH
純度(Purity, HPLC):>98%
儲存條件:-20℃
結構式:

名稱:激動素
貨號:SY0622
規(guī)格:500mg|1g
激動素(Kinetin),又稱6-糠基氨基嘌呤(6-Furfurylaminopurine),是一種腺嘌呤類植物細胞分裂素,可與其他植物生長素,如indole-3-acetic acid (IAA), indole-3-butyric acid (IBA), 1-napthaleneacetic acid (NAA)等聯(lián)合使用用于植物細胞培養(yǎng),主要起到誘發(fā)愈傷組織,以及促使愈傷組織到植物組織的再生作用。
中文別名:6-糠基氨基嘌呤;N6-呋喃甲基腺嘌呤
英文別名:6-Furfurylaminopurine; N6-Furfuryladenine
CAS:525-79-1
分子式:C10H9N5O
分子量:215.2
熔點:269 - 271℃
外觀:白色結晶
純度:>98%
溶解性:溶于稀鹽酸或稀堿溶液,微溶于冷水、乙醇
儲存條件:-20℃,有效期三年
結構式:

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