QN0958 通用引物 27F

產品簡介
北京百奧萊博供應的通用引物 27F用于生化實驗研究等領域,我公司的通用引物 27F品質上佳,經過多年的開發(fā)生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括通用引物 27F在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:通用引物 27F
英文名稱:Universal primers 27F
產品貨號:QN0958
產品規(guī)格:250μl(10uM)|1ml
儲存條件:-20℃
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名稱:miRNA熒光定量RT-PCR檢測試劑盒
貨號:BTN131042
規(guī)格:25次
本試劑盒采用SYBR Green I 嵌合熒光染料法的原理來進行miRNA熒光定量PCR檢測。本產品是專門為miRNA定量檢測而研發(fā)的新一代預混形式的熒光定量PCR檢測試劑。2×miRNA qPCR Mix包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR增強劑等所有PCR所需要的成分。miRNA qPCR Mix中所含的熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA結合,使該產品可用于不同靶序列的檢測而不需合成特異性標記探針。其中的Taq DNA polymerase是經化學修飾的熱啟動酶,配合獨特的緩沖體系,使反應特異性更好,靈敏度更高,并能在更廣的范圍內對miRNA進行準確定量。
產品特點:
1. 簡便、快捷完成miRNA的檢測。
2. 檢測通量高,只需zuì少的RNA樣本,即可同時進行多種目標miRNA的檢測。
3. 檢測特異性好,獨特的miRNA引物設計技術及其優(yōu)化的反應體系避免了非特異性擴增、特別是Pre-miRNA的污染。
4. 檢測分辨率高:該系統(tǒng)能分辨單堿基差異的miRNA。
5. 檢測靈敏度高:可在低至pg級的總RNA中檢測到特異表達的miRNA。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
2×miRNA qPCR Mix | 0.75ml |
Reverse Primer(10μm) | 30μl |
RNase-Free Water | 1ml |
miRNA cDNA鏈合成試劑盒 | 25T |
說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、miRNA cDNA鏈合成
請參見miRNA cDNA 鏈合成試劑盒產品使用說明書。
二、miRNA熒光定量檢測
1.室溫融化2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer(10μm)。
2. 使用時請將2×miRNA qPCR Mix上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經短暫離心后使用。如果試劑沒有混勻,其反應性能會有所下降。
3. 按照下表組分配制熒光定量PCR反應體系:
試劑組份 | 體積 |
2×miRNA qPCR Mix | 25μl |
Forward Primer(自備) | 1μl |
Reverse Primer | 1μl |
miRNA 鏈cDNA | xμl |
RNase-Free Water | 至50μl |
4. 建議反應程序設置如下:
循環(huán) | 溫度 | 時間 |
1× | 95℃ | 10min |
40~45× | 95℃ | 15s |
60℃ | 1min | |
溶解曲線分析 | 根據PCR儀要求設定 |
注意事項:
1. miRNA 鏈cDNA的加入量不要超過Real time PCR 體積10%。
2. 對于特殊的檢測體系,高含量的cDNA 模板易導致非特異性擴增,根據所檢測miRNA的豐度適當的稀釋cDNA(稀釋10倍或者100倍)。
3. 2×miRNA qPCR Mix中含有SYBR Green I和ROX染料,保存本產品或配制PCR反應液時應避免強光照射。
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