ALH042 骨RNA提取試劑盒
- 產品/服務：ALH042 骨RNA提取試劑盒
- 型 號：ALH042
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1005
產品簡介
骨RNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品用于科學研究，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多骨RNA提取試劑盒等RNA提取純化產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括骨RNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：骨RNA提取試劑盒
英文名稱：Bone tissue RNA Extraction Kit
產品貨號：ALH042
產品規格：50次
本試劑盒適用于快速提取骨組織細胞總RNA，骨組織堅硬、骨細胞密度低、而且外周基質含有大量黏蛋白（蛋白多糖）和RNA難以分離，無法用傳統Trizol法進行高質量提取。本試劑盒采用獨特的不含苯酚/lǜ仿配方的裂解液，并添加多種成分去除骨組織蛋白多糖。同時獨特基因組DNA清除柱技術可以有效清除gDNA殘留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反轉錄PCR、熒光定量PCR等實驗。獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶，離心沉淀去除多糖和次級代謝產物，然后裂解混合物用乙醇調節RNA結合吸附到基因組DNA清除柱，然后RNA被選擇性洗脫濾過， 吸附在基因組DNA清除柱上的殘留DNA無法洗脫連同柱子一起丟棄從而清除掉DNA。濾過的RNA用乙醇調節結合條件后，RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物，蛋白等雜質去除， zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。
試劑盒特點：
1.完全不使用有毒的苯酚，lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.簡捷，單個樣品操作一般可在35分鐘內完成，上zuì簡單快速的試劑盒。
3.獨特研發成功基因組DNA清除柱技術可以有效清除gDNA殘留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反轉錄PCR、熒光定量PCR等實驗。
4.適應性廣泛，可以提取各種骨組織包括礦化骨組織。
5.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9～2.2，基本無DNA殘留,可用于RT-PCR，Northern-blot，二代測序和各種實驗。
試劑盒組份：
| 組份 | 50次 |
| 裂解液CLB | 50ml |
| Plantbalb | 5ml |
| 裂解液RLT Plus | 25ml |
| 去蛋白液RW1 | 40ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 50套 |
| 基因組DNA 清除柱和收集管 | 50套 |
注意事項：
1. 所有的離心步驟均可在室溫完成（4℃離心也可以），使用轉速可以達到13000rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 需要自備乙醇，研缽或者其它合適的破碎骨組織裝置。
3. 樣品處理量不要超過基因組清除柱DA和和RNA吸附柱處理能力，否則造成DNA殘留或產量降低。開始摸索實驗條件時，如果不清楚樣品DNA/RNA含量時可使用較少的樣品處理量，將來根據樣品試驗情況增加或者減少處理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. 關于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA 提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA 的微量殘留（DNase 消化也無法做到無殘留），本試劑盒RNA 提取產品，由于采取了本公司獨特的緩沖體系和基因組DNA 清除柱技術，大多數DNA 已經被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反轉錄PCR 和熒光定量PCR。個別特殊情況如DNA 含量過于豐富造成殘留或者要進行嚴格的mRNA 表達量分析熒光定量PCR，我們建議在進行模板和引物的選擇時：
1) 選用跨內含子的引物，以穿過mRNA中的連接區，這樣DNA就不能作為模板參與擴增反應。
2) 選擇基因組DNA和cDNA上擴增的產物大小不一樣的引物對。
3) 將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔(cleanup) ，請聯系我們索取具體操作說明書。
4) 在步驟去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上進行DNase I柱上消化處理。購買DNA酶柱上消化試劑盒前可先索取具體操作說明書。
儲存條件：室溫，有效期12個月
本制品別名：骨組織RNA提取試劑盒|快速提取骨RNA試劑盒|骨組織RNA快速提取試劑盒
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名稱：昆蟲RNA柱式提取試劑盒
貨號：BTN81220
規格：50次
本試劑盒是專門用于從富含多糖、糖蛋白、粘蛋白的動物樣品(尤其是昆蟲樣品)中提取總RNA的試劑。
試劑盒特點：
1. 操作簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。
2. RNA純度高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數昆蟲中的多糖污染。
3.適用于各種昆蟲組織，每100mg組織能提取到20-30μg 總RNA。
4. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。
5.一站式，提供RNase-free的樣品收集管。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 離心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脫液 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸，4℃保存(RNA洗脫液zuì好4℃保存)，有效期一年。
使用方法：
1. 將50-300mg昆蟲組織放入10-15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織，硯磨完后加入1mL溶液A。
注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
2. 將勻漿物或硯磨物轉移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。
3.在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備lǜ仿，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
4.室溫12000 rmp離心3～5分鐘，兩相間將有約5-10毫米厚的細胞破碎物。
5. 將上清液(約0.6mL)轉移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，下層有機相和中間層含有DNA、蛋白質和其他雜質，避免觸及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
6. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。
7. 將一半的溶液轉移到離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加0.7mL通用洗柱液，室溫12000 rmp離心半分鐘，棄穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液，室溫12000 rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。
11.室溫12000 rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
12. 將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中，加入50-100μl RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 12000 rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。注意：大部分昆蟲的28S RNA被切割成兩個小的片段，彼此用氫鍵相連，所以在甲醛變性膠中，沒有28S帶出現(文獻見：Eva C. Winnebeck，Craig D. Millar and Guy R. Warman，Why does insect RNA look degraded? Journal of Insect Science: Vol. 10：1-7)
15. RNA產量產率測定：將5-10μl RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進而計算出RNA的產量(濃度X體積)和產率(RNA產量/組織用量)。
16. RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關)，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染，但一般不影響RT-PCR等反應。
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