MQ0008 XL1-Blue化學感受態細胞
- 產品/服務：MQ0008 XL1-Blue化學感受態細胞
- 型 號：MQ0008
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1092
產品簡介
北京百奧萊博供應的XL1-Blue化學感受態細胞用于科研目的，我公司的XL1-Blue化學感受態細胞品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括XL1-Blue化學感受態細胞在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：XL1-Blue化學感受態細胞
英文名稱：XL1-Blue Chemically Competent Cell
產品貨號：MQ0008
產品規格：10×100μl/50×100μl
XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩定復制，recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。
hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失，增強了外源DNA的穩定性和提取質量。lacIqZΔM15的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素抗性。
XL1-Blue感受態細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率>1×109cfu/μg。
保存條件：-80℃
基因型：
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44(rk-,mk+)，relA1 lac [F" proAB lacIqZ?M15：Tn10(tetr)]
操作說明：
1.XL1-Blue感受態細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中)，加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
注意事項：
1.感受態細胞zuì好在冰上融化。
2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒或率的連接產物可相應減少zuì終用于涂板的菌量。
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儲存條件：低溫運輸，-20℃避光保存，有效期6個月。
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貨號：YT478
規格：1μg
本質粒是哺乳動物細胞表達質粒，用于表達N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黃色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質粒含有CMV啟動子，可以啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的前面有一個YFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據閱讀框插入目的基因就可以表達N端含有YFP標簽的融合蛋白。利用YFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內定位，也可以利用YFP抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。YFP與GFP高度相似，可以嘗試用GFP抗體檢測YFP。該質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后，可以使用G418篩選穩定表達目的蛋白的細胞株。
本質粒質粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| YFP | 677-1393 |
|
Multiple clo | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本質粒(5003bp)的圖譜如下：
使用說明：
1. 次使用時請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 本質粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，構建的質粒可以用常規方法轉染細胞。
儲存條件：-20℃。
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