BTN121122 柱式探針純化試劑盒
- 產品/服務：BTN121122 柱式探針純化試劑盒
- 型 號：BTN121122
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1027
產品簡介
柱式探針純化試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，柱式探針純化試劑盒是我司眾多優質探針標記及檢測之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括柱式探針純化試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：柱式探針純化試劑盒
英文名稱：Column Probe Purification Kit
產品貨號：BTN121122
產品規格：10次
本試劑盒是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中，大分子(標記的核酸探針或Oligo探針)將繞過層析介質，快速穿透出層析柱，小分子(未參入的核苷酸)將進入層析介質中，緩慢穿透出層析柱。根據這一時間差而將兩者分開。此過程的示意圖如下：
產品特點：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質，不需要單獨準備每種試劑，免去用戶自己摸索條件。
2.適用于PCR 標記、隨機引物標記、切口平移和填入法標記。
3. 能去掉大部分的未標記物、鹽離子等小分子。
4. 足夠10次純化使用，每次可以純化50μl的標記反應液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素標記的DNA和RNA探針(由于標記分子帶非性基團，容易進入有機相，因此這些探針不能用傳統的酚lǜ仿抽提-乙醇沉淀法純化)。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| Sephadex G50 介質 | 15ml |
| 0.7mL離心柱及管套 | 10套 |
| TE溶液 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
注意：由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低，非常容易吸附到槍頭或離心管的表面，造成探針的損失，因此zuì好使用硅化的離心管和槍頭。
1. 搖晃Sephadex G50介質至均勻，迅速轉移0.5mL 到離心柱中，套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm室溫離心1分鐘，Sephadex G50介質將壓緊在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液，再加0.5mL的搖晃后得到的Sephadex G50 介質，2000rpm室溫離心1分鐘。
4. 經上述步驟會得到體積約為0.5mL 壓緊后的Sephadex G50介質。如不足，再加入少量的G50介質離心，直到體積達到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50μl TE緩沖液，套上套管，2000rpm室溫離心1分鐘，測量收集管中穿透液的體積。
6. 重復上步3-5次，直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣(50μL)。
7. 將50μl的標記探針(必須使用50μl樣品。如果沒有50μl，需要用TE緩沖液或水補足到50μl)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面，套上一個自備的(zuì好是硅化的)離心管。
8. 2000rpm室溫離心1分鐘，離心管中的穿透液將含標記探針，未參入的標記物將滯留在介質中。
9.電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。
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名稱：TdT加尾法DNA生物素標記試劑盒
貨號：BTN90605B
規格：5次
本試劑盒是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而設計，該反應的示意圖如下：
產品特點：
1.快速，15分鐘即可完成標記反應。
2. 不但可用于單鏈DNA和DNA Oligo標記，還可用于3′突出的雙鏈DNA標記，但后者標記效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高xīn標記的核苷酸等)。
4. 提供不帶標記核苷酸、帶生物素標記核苷酸和帶地高xīn標記核苷酸三種選擇。
5. 同時提供非標記的dATP，用戶可以用其調節加尾長短和標記核苷酸摻入比例。
6. 標記的探針可用于電泳遷移率實驗(EMSA)、原位雜交(ISH)、Northern Blot(不推薦用于低豐度RNA檢測)、小RNA Northern、Southern Blot(不推薦用于單拷貝基因檢測)、菌落雜交、斑點印跡雜交分析等。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| TdT緩沖液，5× | 20μl |
| TdT(末端轉移酶，10U/μL) | 10μl |
| dATP，2mM | 5μl |
| 標記核苷酸 | (A、B、C不同，見注) |
| 超純水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
注：A型用于自選標記，用戶需自備標記核苷酸，本產品不提供標記核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
1.在0.2mL微量離心管中按下表設置一個20μl體系的標記反應(如果需要標記更多探針，請增加標記體積而不要增加探針DNA的濃度)：
| 成份 | 用量 |
| 探針DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer，5× | 4μl |
|
標記核苷酸，1mM (A型需自備標記核苷酸) | 1μl |
| dATP，2mM | (見下注) |
| TdT末端轉移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超純水 | 補到20μl |
注：dATP可以不加，但這樣得到的加尾全部是標記核苷酸，由于空間阻礙，靈敏度不一定zuì佳。如果雜交效果不好，摻入一定比例的dATP到標記核苷酸中，以控制標記的密度，提高比活。具體比例如何可以自己優化。
2. 37℃反應15分鐘，延長到30分鐘也可以。如果沒有非標記核苷酸存在，一般可以加尾3-5個Biotin或DIG標記的核苷酸(標記物空間阻礙抑制延長)；如果有在加尾反應中加入一定比例的非標記核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本試劑盒只提供dATP而已)，每條探針上可加上約100個核苷酸，平均含5個標記核苷酸
3. 70℃ 10分鐘滅活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE電泳+銀染(相關試劑需要另購)檢測標記效率，帶標記的探針泳動速度將低于沒標記的探針。
5. 如果是非同位素標記，探針不需純化可以直接用于雜交。如果需要純化非同位素標記的探針，請不要酚/lǜ仿抽提，因為非同位素標記物一般會使探針DNA進入有機相而丟失。
6. 使用時需將探針以1-8 ng/μL的終濃度加入到雜交液中(如果探針是雙鏈DNA，加入前還需熱變性)。如果不立即使用，非同位素標記的探針DNA可-20℃長期放置一年，同位素標記的探針DNA不能放置。
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