KFS314 細胞周期檢測試劑盒

產品簡介
細胞周期檢測試劑盒是高品質的細胞凋亡與增殖產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科學研究,我公司的細胞周期檢測試劑盒品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括細胞周期檢測試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:細胞周期檢測試劑盒
產品貨號:KFS314
產品規格:20T|50T
本試劑盒可應用于培養細胞(懸浮、貼壁)的DNA 含量(細胞周期)檢測。細胞周期(cell cycle)是指連續分裂細胞從一次有絲分裂結束到下一次有絲分裂結束所經歷的整個過程。在這個過程中,細胞遺傳物質復制并加倍,且在分裂結束時平均分配到兩個子細胞中去。細胞周期又可以分為間期(interphase)和有絲分裂期(M phase),細胞間期又常劃分為休眠期(G0),DNA 合成前期(G1),DNA 合成期(S),DNA 合成后期(G2),整個周期可表示為G1→S→G2→M。DNA 周期檢測可用來反應細胞周期的各個期的狀況,即細胞增殖狀況。利用細胞內DNA 能夠和熒光染料(如碘化丙啶PI)結合的特性,細胞各個時期其DNA 含量不同從而結合的熒光染料不同,流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣。
細胞發生凋亡時,由于胞漿和染色質濃縮、核裂解,產生凋亡小體,使細胞的光散射性質發生變化。在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對900 角光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期,前向角和900 角光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察凋亡細胞。用PI 對細胞進行染色,凋亡細胞由于總DNA 量降低,于正常G0/G1 細胞群前出現DNA 低染細胞群,即G1 峰前出現亞二倍體峰(sub-G1),細胞凋亡群。
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名稱:TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)
貨號:YT137
規格:20次|50次
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品,經過生物素標記和后續的DAB顯色等步驟,即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。
試劑盒組分:
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀釋液———1ml
DAB顯色液A————————6ml
DAB顯色液B————————6ml
標記反應終止液——————6ml
細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3"-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP),隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結合,zuì后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞,從而可以通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞,這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
本試劑盒有如下優點:
(1)高靈敏度:背景染色低,陽性染色強,可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡,同時由于凋亡早期就有 DNA斷裂,可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性好:TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞,而不容易標記壞死細胞。
(3)快速:僅需約2-3個小時即可完成。
(4)應用范圍廣:可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂,但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開,另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂,此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下,zuì好同時檢測多個凋亡指標。
注意事項:
1. 需自備用于洗滌細胞的PBS或HBSS,用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097)等適當的封片液,用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購免疫染色固定液(YT086),同時需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購免疫染色洗滌液(YT089)。 需自備過氧化氫,除石蠟切片外需自備甲醇。
2. 如果用于石蠟切片的檢測,需自備蛋白酶K,二甲苯。
儲存條件:-20℃。

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