WE0174 植物基因組DNA提取試劑盒
- 產品/服務：WE0174 植物基因組DNA提取試劑盒
- 型 號：WE0174
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1109
產品簡介
植物基因組DNA提取試劑盒是高品質的DNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科研試驗，植物基因組DNA提取試劑盒是我司眾多優質DNA提取純化之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括植物基因組DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：植物基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0174
產品規格：50次|200次
本試劑盒采用、專一結合核酸的離心吸附柱和獨特的緩沖系統，適合從各種不同的植物新鮮或凍存組織中提取基因組DNA，并可zuì大限度地去除植物組織中的雜質。本試劑盒無需使用酚/氯fǎng抽提，操作安全。提取的基因組DNA片段大、純度高、質量穩定可靠，適用于PCR、熒光定量PCR、分子標記、文庫構建等實驗。
試劑盒組成：
| 組份 | 50次 | 200次 |
| Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
| Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
| Buffer LP3(濃縮液) | 21ml | 84ml |
| Buffer GW2(濃縮液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自備試劑：無水乙醇
實驗前準備及重要注意事項：
1、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。
2、次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入無水乙醇。使用前請檢查Buffer LP1和Buffer LP2是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請將Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步驟：
1、取植物新鮮組織100 mg左右或干重組織約20 mg，加入液氮充分研磨。
2、將研磨后的粉末收集到離心管(自備)中，加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml)，渦旋振蕩1分鐘，室溫放置10分鐘，使其充分裂解。
注意：
1)使用渦旋振蕩或移液器吹打，充分裂解組織，組織裂解不完全會影響zuì終的DNA得率。
2)請勿在使用前將Buffer LP1與RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2，混勻，渦旋震蕩1分鐘。
4、12000rpm(~～13400×g)離心5分鐘，將上清移至新的離心管(自備)中。
5、加入1.5倍體積的Buffer LP3(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，充分混勻(如500μl濾液加入750μl Buffer LP3)。
注意：加入Buffer LP3后應立即混勻，可能會產生沉淀但不影響后續實驗。
6、將上步所得溶液和沉淀全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：如吸附膜呈現綠色，向吸附柱中加入500μl無水乙醇，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、重復步驟7.
9、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR 等)。
10、將吸附柱放到一個新離心管(自備)中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-100μl Buffer GE或滅菌水，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟10；若洗脫體積小于100μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少DNA的總產量。如果所得DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE進行洗脫。
4)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
儲存條件：室溫(15～30℃)。
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名稱：紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用)
貨號：BTN90309
規格：250mL
本品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細胞而基本不破壞白細胞和其他淋巴細胞的完整性和生物學活性。由于紅細胞是血液的主要細胞成份，不含DNA和RNA，其所含血紅素能抑制PCR反應，所以先用本產品裂解紅細胞，再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。
產品特點：
1.可以處理人全血、小鼠全血、脾細胞中的紅細胞。
2.，一次處理能裂解80%以上的哺乳動物紅細胞，能回收90%左右的白細胞。一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴容性好，可以一次處理多達幾十毫升的樣品，也可以處理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法，得到的白細胞主要用于流式細胞分析。
儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
用去離子水將本產品(10×)稀釋為1×工作液(1mL 本產品加9mL去離子水)，待溫度回到室溫或37℃加熱到37℃的時候再使用。工作液不能長期放置，只能現配現用。
一．裂解哺乳動物全血中的紅細胞
1.離心哺乳動物抗凝血液后棄血漿部分，按每1mL 哺乳動物抗凝血液細胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入紅細胞裂解液B型的1×工作液。
2. 輕柔吹打充分混勻。
3.室溫放置 15分鐘(注意：放置時間不要超過15分鐘)。
4. 4℃1000rpm離心10分鐘，吸棄紅色的上清液。
5. 如果紅細胞裂解不完全，可以重復第 1-4 步。
6. 用適當的自備緩沖液(如Hanks溶液)重懸白細胞沉淀。
7. 用于細胞計數和流式細胞分析等后續試驗。
二．裂解組織細胞中的紅細胞
1. 按標準方法用自備的胰酶將組織消化成單個細胞懸液，離心棄上清。
2. 按 1：10的比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液B型工作液，輕柔吹打均勻。
3.室溫放置 15分鐘(注意：放置時間不要超過15分鐘)。
4. 4℃ 1000rpm離心10分鐘，吸棄紅色的上清液。
5. 如果紅細胞裂解不完全，可以重復第 2-4 步。
6. 用適當的自備緩沖液(如 Hanks溶液)重懸白細胞沉淀。
7. 用于細胞計數和流式細胞分析等后續試驗。
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